肥達凝集試驗檢測傷寒桿菌
傷寒是由傷寒桿菌引起的急性腸道傳染病，病理學改變主要是全身單核細胞巨噬細胞系統的增生性反應，尤以回腸下段淋巴組織病變最明顯。臨床特征為持續發熱、相對緩脈、全身中毒癥狀、消化道癥狀、玫瑰疹、肝脾大及白細胞減少等。腸出血、腸穿孔為主要的嚴重并發癥。以兒童及青壯年為多見，病后有持久免疫力。流行多發生在衛生條件不良的地區，以夏季和秋季多見。常見的實驗室檢查為肥達凝集試驗。
[檢測方法] 肥達凝集試驗
[標本準備] 血清，靜脈血3ml不抗凝。
[方法學原理] 用已知傷寒沙門菌菌體(O)抗原和鞭毛(H)抗原及甲、乙、丙3種副傷寒沙門菌鞭毛抗原的診斷菌液，與被檢血清作細菌凝集反應。若被檢血清中有抗體存在，可與相應抗原起反應，出現肉眼可見的凝集現象為陽性。
[試劑] 診斷菌液有傷寒O、H及副傷寒A、B、C，共5種。使用時用生理鹽水稀釋成每毫升含7～10億個菌的懸液備用。
[檢測步驟
1．取lOmm×lOOmm試管5排，每排8支。
2．另取15mm×lOOmm試管1支，加生理鹽水4．75m1及患者血清0．25ml混合，成為1：20稀釋血清。
3．每排第l管內各加1：20稀釋血清0．5ml。
4．在剩余的2．5ml稀釋血清(1：20)中加人生理鹽水2．5ml，成為1：40稀釋血清。
5．再取1：40的血清，分別加入每排第2管中，每管0．5ml。在剩余的2．5ml稀釋血清(1；40)中，加入生理鹽水2．5ml，成為1；80稀釋，再加入每排第3管中，每管0．5ml，如此操作，直至加完每排第7管為止。
6．每排最后1管各加生理鹽水0．5ml，作為不含血清的菌液對照。
7．取5種菌液充分搖勻，每種菌液加1排，血清最終稀釋度分別為1；40、1；80、1：160直至1：2 560。振蕩混合，置37C水浴16～20h后觀察結果。
[結果判斷] 先觀察液體部分清晰程度，然后輕輕搖動試管，觀察管底有無凝塊浮起：
1．液體澄清、管底有凝塊、細菌完全凝集者(100％凝集)，為柵++++。
2．液體微混濁、管底有明顯凝塊、細菌大部分凝集者(75％凝集)，為+++。
3．液體較混濁、管底有明顯凝塊、細菌中度凝集者(50％凝集)，為++。
4．液體混濁、管底無凝塊、細菌輕度凝集者(25％凝集)，為+。
5．液體混濁、無凝集現象，為陰性。
6．對照管均勻混濁無凝集現象。
7．被檢血清出現++凝集的最高稀釋倍數為凝集效價。如第3管出現仲凝集，則判為1：160陽性；如各管均無凝集現象，則判為
[正常參考值] 傷寒沙門H凝集效價1：80以下，傷寒沙門菌O凝集效價及各型副傷寒沙門H凝集效價均在1：40以下。
[注意事項]
1．過去曾預防接種傷寒、副傷寒疫苗者，H抗體效價明顯升高，并持續數年，而O抗體低于正常值。
2．以往患過傷寒病或曾接種傷寒疫苗，新近又感染流行性感冒或布魯病，可產生高效價H抗體，O抗體則較低，但H抗體很快消失，此種反應稱回憶反應。
3．由于人們在日常生活中可能發生隱性感染而產生抗體，尤其在流行地區正常人的凝集效價可稍高，故在判斷結果時應考慮本地區正常人群的自然凝集效價水平作為參考。
4．沙門菌屬各菌種之間有某種共同抗原，在凝集試驗中可能出現類屬交叉凝集反應，但效價較低。
5．陰性結果不能完全排除傷寒的可能，應注意有10％左右已確診為傷寒者在整個病程中抗體效價始終不升高。這可能與早期應用抗生素、藥物抑制、免疫耐受和缺陷有關。
6．肥達反應特異性不高，機體免疫功能紊亂、結核、敗血癥、病毒性肝炎及部分血吸蟲患者可出現假陽性反應。
7．溶血、菌液過濃等均會影響結果。菌液過期或產生自凝者不宜使用。
[臨床意義]
L肥達反應通常第1周陽性率僅10％，第2周約50％，第3、4周可達80％-90％，陽性率逐周上升，可達70％～90％，但假陽性率亦達10％～20％。
2．接種傷寒疫苗者亦可出現陽性反應，早期應用抗菌藥物治療者可出現陰性反應。
3．檢驗結果分別以O、H、A、B、C表示凝集試驗中傷寒桿菌菌體抗原、鞭毛抗原、甲乙丙鞭毛抗原的相應特異性抗體，雙份血清抗體效價O≥1：80及H≥1：160者亦有診斷價值。由于傷寒桿菌和副傷寒桿菌具有部分相同的菌體抗原，所以僅有O抗體的升高不能區分傷寒及副傷寒，須依靠HOAB抗體加以區別。
4．接種傷寒疫苗或患過傷寒者，發熱可引起回憶反應而出現假陽性結果。僅有O抗體陽性，而H抗體陰性可能是疾病早期；僅有H抗體陽性而O抗體陰性，提示曾經預防接種或患過傷寒。