腫瘤標志物檢測方法

   同一個標志物可用不同方法進行檢測，如可以從血清學水平、免疫組化檢測CEA或P-gp等，也可以用FCM或RT-PCR來檢測。

      血清學水平：除傳統的放射免疫分析（RIA）和酶聯免疫分析（ELISA）外，目前在國內主要有三類全自動免疫化學分析系統（化學發光免疫分析系統；熒光免疫分析系統和電化學發光免疫分析系統）廣泛的應用于臨床，對血清腫瘤標記物檢測具有快速、準確、半定量。可檢測AFP、CEA、CA19-9、CA72-4、CA125、CA15-3、NSE、Cyfra21-1、PSA、f- PSA等。

      組織學水平：免疫組化和原位分子雜交組化技術是近年發展起來的一門新興邊緣學科。它將免疫學技術和分子生物學技術同組織病理學制片方法巧妙結合在一起，在組織細胞原位顯示某些化學成分和特定基因片段。

      常規標本中約5%～15%疑難病例或惡性腫瘤需采用免疫組化進行鑒別診斷和預后分析。 Porter D利用mRNA原位雜交檢測細胞水平基因表達，在組織芯片上免疫組織化學檢測乳房導管原位癌和浸潤癌病理學特征和臨床意義。 )

     圖像分析技術可以定量測定組織切片上腫瘤細胞DNA含量和形態學分析，對判斷腫瘤惡性度及預后具有重要臨床價值。

      細胞學水平：流式細胞術（Flow Cytometry, FCM）。是利用FCM對細胞和細胞器的結構和某些功能進行定量檢測，并利用細胞表面特異性標志對特定細胞亞群進行分析和分選的先進技術方法。檢測白血病和淋巴瘤標記物(CD系列)利于診斷和鑒別診斷；用FCM檢測惡性腫瘤細胞的P-gp可為臨床選擇化療藥物提供依據；我們用FCM檢測消化道腫瘤外周血CD44水平。

      電鏡：電鏡酶細胞化學技術、免疫電鏡技術、原位雜交電鏡技術。

      分子學水平：聚合酶鏈反應法（PCR）是一種極為簡單、敏感、高效、特異和快速的能在體外進行擴增DNA的技術。

      目前，國內外用ＲＴ-ＰＣＲ方法檢測外周血中的腫瘤細胞的主要標記基因有細胞角蛋白19(CK19 mRNA)和20(CK20mRNA)用于上皮性惡性腫瘤；癌胚抗原(CEAmRNA)用于結直腸癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌等CEA分泌性腫瘤；甲胎蛋白( AFPmRNA)用于肝細胞癌微轉移的檢測。

       生物芯片分析系統：①基因芯片。Zhu G報道用顯微切割和芯片技術結合分析乳房癌不同部位腫瘤細胞之間基因表達差異。②組織芯片[18]。組織芯片可以幫助節省試劑、人力和費用。過去分析一個腫瘤的試劑量現在可以分析高達數百個甚至1000個腫瘤,而且是在同一張切片上同時進行。③蛋白芯片。為多標志聯合檢測提供了理想的工具，英國RANDOX公司已經在全球同時推出的包含8種腫瘤標志的蛋白芯片。