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  • 發布時間:2023-07-07 14:47 原文鏈接: 胃蛋白酶的含量測定方法

    照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定鹽酸溶液取1mol/L鹽酸溶液65ml,加水至100ml供試品溶液取本品適量,精密稱定,加鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.2~0.4單位的溶液。對照品溶液取酪氨酸對照品適量,精密稱定,加鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.5mg的溶液。測定法取試管6支,其中3支各精密加入對照品溶液1ml,另3支各精密加入供試品溶液1ml,置37℃±0.5℃水浴中,保溫5分鐘,精密加入預熱至37℃±0.5℃的血紅蛋白試液5ml,搖勻,并準確計時,在37℃±0.5℃水浴中反應10分鐘,立即精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,搖勻,濾過,取續濾液備用。另取試管2支,各精密加入血紅蛋白試液5ml,置37℃±0.5℃水浴中保溫10分鐘,再精密加入5%三氯醋酸溶液5m,其中1支加供試品溶液1ml,另1支加鹽酸溶液1ml,搖勻,濾過,取續濾液,分別作為供試品與對照品的空白對照,在275nm的波長處測定吸光度,算出平均值As和A,按下式計算。A×Ws×n每1g含胃蛋白酶的量(單位)=As×W×10×181.19式中As為對照品的平均吸光度A為供試品的平均吸光度;Ws為每1m1對照品溶液中含酪氨酸的量,HgW為供試品取樣量,g;n為供試品稀釋倍數在上述條件下,每分鐘能催化水解血紅蛋白生成1mol酪氨酸的酶量,為一個蛋白酶活力的單位。

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