膽 紅 素
問： 目前國內膽紅素在臨床檢驗中主要存在哪些問題？
答： 主要有三個方面的問題：
臨床檢驗結果之間的可比性較差：同樣一個檢測樣品，各廠家生產的試劑盒其檢驗結果往往相差很大，但并不能因此判斷出試劑盒的好壞。
正常水平的膽紅素含量比較低，使得檢測方法的靈敏度和檢測儀器的精密度成為影響檢測結果的重要因素之一。
氧化法測定膽紅素過程中對pH值的要求很嚴格，外來影響導致pH值的變化對檢測結果產生很大的影響。
問： 為什么臨床檢驗結果之間的可比性較差？
答： 主要存在兩方面的問題：
標準品問題：膽紅素本身不穩定，不易保存，特別是直接膽紅素制備困難；由于國內目前沒有統一的標準品供應，造成膽紅素標準品的標準化問題得不到解決；目前市場上銷售的膽紅素標準品多為各種膽紅素的混合物（或異構體），不適于作為直接膽紅素測定的標準物。
直接膽紅素測定方法學上的概念模糊：一方面，近來膽紅素測定的方法主要有兩類，即重氮法和氧化法。據文獻報道，重氮法檢測了結合膽紅素（Bc）和大部分的δ膽紅素，Bc又包括mBc和dBc，而氧化法檢測了結合膽紅素（Bc），是否包括δ膽紅素還是個未知數，尚無相關數據；另一方面，直接膽紅素和結合膽紅素的概念模糊，導致有人認為直接膽紅素就是結合膽紅素，也有人認為酶氧化法測定的結果是結合膽紅素，而化學氧化法測定的結果是直接膽紅素。由于上述的概念模糊，造成臨床上對檢測結果的解釋發生問題。
問： 上面講到了多種膽紅素，但膽紅素具體是怎樣分類的還不是很清楚，能不能做一個簡單的介紹？
答： 根據最近修正的膽紅素定義，總膽紅素應包括游離膽紅素（Bu）、結合膽紅素（Bc）及δ膽紅素（Bδ），其中結合膽紅素（Bc）又分為mBc和dBc。在重氮反應中，直接膽紅素包括結合膽紅素Bc（mBc及dBc）和δ膽紅素（Bδ），文獻報道只有85%左右的Bδ與重氮試劑發生直接反應。
問： 在氧化法檢測膽紅素的過程中，如何減少pH值的影響？
答： 加倍注意儀器的清洗，一定要清洗干凈對于某些儀器，膽紅素的檢測要避開強酸、強堿試劑項目，以防污染。
問： 如何解釋同一標本，直接膽紅素的重氮法檢測結果通常會高于氧化法的檢測結果？
答： 因為重氮法檢測了結合膽紅素（Bc）和大部分的δ膽紅素（Bδ），而酶氧化法等只檢測了結合膽紅素（Bc）。
尿 素 氮
問： 目前尿素氮在臨床檢驗中主要存在哪些問題？
答： 主要有四個方面的問題： 試劑穩定性較差。試劑中酶量不足，特別是NADH的不足。存在方法學上的缺陷。一些抗凝劑的不當使用也會導致檢測結果的偏差。
問： 尿素氮試劑的穩定性為什么較差，針對這個問題如何解決？
答： 尿素氮試劑的穩定性差是由于試劑中NADH的不穩定造成的。NADH容易被氧化，造成吸光度下降，并且目前尚無好的方法能夠使尿素氮試劑中的NADH保持穩定。這個問題可以用標準加以控制，在檢測的過程中經常定標。
問： 為什么在臨床檢驗中尿素氮試劑的線性不好，造成BUN高值檢測不出？
答： 同上面的問題一樣，原因都出在NADH的穩定性上。NADH被氧化后含量降低無法完成同BUN的偶聯反應。
問： 針對NADH含量低的問題，如何解決？
答： 根據相關報道，有人建議在試劑中加入正常用量6倍的NADH。
問： BUN檢測方法學上存在什么缺陷？
答： 目前尿素氮的檢測方法主要是脲酶-NADH偶聯法，該方法學存在以下2個缺陷：其一，血清中的血氨含量增高的情況下，會同時消耗GLDH和NADH，使得檢測結果不準確；其二，內源性的酶與指示酶GLDH競爭氧化NADH，從而降低了酶促偶聯系統的準確性。
問： 尿素氮檢驗方法學上的缺陷如何彌補？
答： 目前尚無好的解決方法，但可以根據臨床診斷結果來糾正參數，例如延長延遲時間等。
問： 什么樣的抗凝劑會造成檢測偏差？
答： 帶氨的抗凝劑會消耗GLDH和NADH，造成檢測結果的正偏差；而含有抑制脲酶活性成分的抗凝劑會造成檢測結果的負偏差。