采血后立即送檢，檢測操作嚴格按規范操作。基本步驟是先洗滌已包被抗胰胚抗原抗體的微孔板后，分別加受檢標本、陰、陽性參考血清，遞經保溫洗滌后，加酶標記抗胰胚抗原抗體，同法保溫洗滌，加底物顯色。
定量測定時，每孔加鄰苯二胺和過氧化化氫配制的底物液100μl，置37℃水浴15min，中止反應，觀察結果。如作定性測定，最好用四甲基聯苯胺（TMB）和過氧化化氫配制的底物液，每孔100μl，置37℃水浴5～15min。結果用酶標比色儀讀取A492nm值。定量測定可以參考標準液中的胰胚抗原濃度為橫坐標，以測定孔A值為縱坐標，在半對數坐標紙上繪制標準曲線，按受檢標本的A值從表中查知胰胚抗原含量。