實驗方法原理
人和小鼠的脂肪組織均可用于分離ASC，可以獲得相當數目的ASCs。人脂肪組織通常來源于抽脂。小鼠脂肪組織則取自腹股溝處脂肪墊。
實驗材料 小鼠 4?6只
試劑、試劑盒 Hank’s緩沖鹽溶液（HBSS)ASC培養基膠原酶溶液聚乙烯吡咯酮碘溶液麻醉劑：三溴乙醇 37℃水浴
儀器、耗材 Petris培養皿 9 cm離心管 50 ml組織培養瓶 25 cm2剪刀（2把）鑷子（2把）
實驗步驟
(a)37℃水浴中預熱HBSS和ASC培養基。
(b)麻醉動物后處死。
(c)轉移動物至層流凈化罩中。
(d)70%酒精消毒腹部。
(e)采用低位橫向切口打開腹腔。
(f)用鑷子取出性腺/附睪和腹股溝處的脂肪墊。
(g)將脂肪置于培養皿中，加入HBSS。
(h)待所有動物脂肪取出后，將脂肪轉移至新的培養皿中。
(i)加人含有5%聚乙烯吡咯烷碘酮的HBSS 2?3 min。
(j)漂洗組織并用HBSS洗滌脂肪。
(k)用無菌鑷子將脂肪轉移至50 ml離心管中。
(l)用無菌剪刀將脂肪切碎。
(m)加入與組織體積相同的膠原酶溶液并混勻。
(n)將離心管置于37℃水浴中60 min,其間不時混勻一下。
(o)離心，50?100 g，5 min。
(p)取出離心管，用力搖晃（將基質細胞與原代脂肪細胞完全分離），再次離心5 min。.
(q)小心吸去上層油脂，油脂層中含有原代脂肪細胞，注意不要破壞位于下方的基質-血管細胞層。
(r)加人5?10 ml PBSA,重懸沉淀，再次離心5 min。
(s)洗滌三次，注意不要吸走基質-血管細胞層。
(t)最后一次洗滌后，加人8 ml ASC培養基重懸沉淀，轉移至T25培養瓶中，置于37℃,5% CO2溫箱中。
(u)待細胞貼壁生長2?4天后換液。
(v)換液時通過棄去培養基，從而去除未貼壁的細胞。
(w)以后每周更換培養基2次。