(a)分離和制備臍血來源的MNCs。
(b)如果使用凍存的CB-MNCs,復蘇的細胞可以用于培養，不需要其他分離步驟。
(c)細胞復蘇后在30 min內，用臺盼藍染色進行活細胞計數。
(d)將在培養基中的CB-MNCs接種到T25培養瓶中，接種密度為3×105個細胞/cm2。
(e)將細胞在37℃，5% CO2的條件下培養，每7天更換一次培養基，連續培養2?4周。
(f)去除培養基，用PBSA洗兩次培養瓶(g)用0.05%胰蛋白酶/EDTA處理，使貼壁細胞重懸，按1×106個細胞/瓶的密度重新接種。
(h)細胞生長達到匯合后，按1:3稀釋后重新接種，在相同的培養條件下繼續培養。
(i)在培養過程中，用臺盼藍染色進行細胞計數，估計總細胞數 展開 | 