色譜儀的分離效能指標有分配系數、分配比、峰高分離度、分離度、理論塔板數、理論塔板高度、有效塔板數、有效塔板高度和柱效率等。
一、分配系數K:
在一定溫度和壓力下,組分在固定相和流動相之間的分配達到平衡時的濃度之比稱為分配系數K。
一定溫度下,組分的分配系數K越大,出峰越慢。
樣品一定時,分配系數K主要取決于固定相性質。
每個組分在各種固定相上的分配系數K不同。
選擇適宜的固定相可改善分離效果。
樣品中各組分具有不同的K值是分離的基礎。
某組分的K=0時,不被固定相保留,最先流出。
二、分配比k:
在一定溫度和壓力下,組分在固定相和流動相之間的分配達到平衡時,組分分配在固定相和流動相中的質量之比稱為分配比k,又稱容量因子。
分配比k是衡量色譜柱對分離組分保留能力的重要參數。
三、峰高分離度θ:
θ=(hi-hm)/hi
式中:hi為小峰的峰高,hm為峰谷的高度。
要求θ值大于0.5。
四、分離度或分辨率R:
R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)
式中:tR 為組分的保留時間,W 為組分的色譜峰寬。
1、R=0.8:相鄰兩峰的分離程度達 89%
2、R=1:相鄰兩峰的分離程度達 98%
3、R=1.5:相鄰兩峰的分離程度達 99.7%
4、R>1.5:相鄰兩峰的基線分離,相鄰兩峰完全分離。
五、理論塔板數 n:
n=16(tR/W)2
式中:tR為組分的保留時間,W 為組分的色譜峰寬。
理論塔板數表達了色譜峰的擴張程度和陡度,但難以說明色譜柱的選擇性。
六、理論塔板高度 H:
H=L/n
式中:L 為色譜柱長,n 為色譜柱的理論塔板數。
七、有效塔板數 n 有效:
n 有效=16(tR′/W)2
式中:tR′為組分的調整保留時間,W為組分的色譜峰寬。
八、有效塔板高度 H 有效:
H 有效=L/n 有效
式中:L 為色譜柱長,n 有效為色譜柱的有效塔板數。
九、柱效率:
色譜分離過程中的動力學因素決定的色譜分離效率稱為柱效率,又稱柱效能。柱效率通常用理論塔板高度和理論塔板數表示。
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