色譜儀毛細管柱的交聯鍵合

色譜儀毛細管柱的交聯鍵合是指將涂漬在毛細管柱內表面的固定液通過分子間的共價連接（交聯），或與毛細管柱內表面連接（鍵合），使液膜穩定性得到提高的制備技術。交聯鍵合可通過固定液的縮合或固定液柱壁上的硅醇基反應形成Si－O－Si鍵，或聚硅氧烷上的甲基或乙烯基經引發劑引發產生Si－C－C－Si（即碳與碳間形成鍵）反應來實現。

一、加熱縮合法：

1、原理：

涂漬在毛細管柱內表面的端羥基固定液在加熱過程中與玻璃表面的硅醇基產生縮合鍵合而實現交聯固化。

2、方法：

將含有一定數量交聯劑的端羥基固定液涂漬在毛細管柱上后，用N₂吹5min，然后把柱兩端封住，在恒溫箱中60℃保持1h，打開柱兩端并將柱子裝在色譜儀上，在約0.4bar壓力下通H₂沖洗，以1℃/min速度升至280℃保持6h，即可完成交聯固化。這種交聯固化可形成大分子網狀結構，可提高柱子的熱穩定性。例如非極性固定液通過甲基三乙基硅氧烷的縮合固化，可使柱子使用溫度提高到380～390℃。

3、常用交換劑：

有甲基三甲基硅氧烷、二甲基二甲氧基硅氧烷和氰丙基三乙氧基硅氧烷。

4、應用：

適用于端羥基固定液，能得到熱穩定性和惰性都很好的毛細管柱。

二、原位自由基引發法：

1、原理：

主要是通過不同自由基母體，如過氧化合物、偶氮化合物、臭氧和γ幅射誘導等產生的自由基與聚合物鏈形成Si－C－C－Si鏈段交聯結構。

2、方法：

將引發劑按一定比例與固定液混合配成涂漬液，按靜態法或動態法涂漬毛細管柱，將柱兩端封住后放在色譜儀柱溫箱內以41℃/min速度升至適當溫度，保持一定時間進行交聯固化。

對液體引發劑的交聯方法是先按常規方法涂漬毛細管柱，涂好后將N₂通入引發劑液體，把引發劑蒸氣帶入毛細管柱約2h，然后按與上述相同的條件交聯。對蒸氣壓較低的液體引發劑可直接加到固定液中。

  3、常用引發劑：

（1）過氧化物引發劑：

有過氧化苯甲酰、過氧化二異丙苯、過氧化叔丁基和過氧化2，4－二氯苯甲酰。

過氧化苯甲酰和過氧化2，4－二氯苯甲酰都很活潑，可在較低的溫度下進行交聯。缺點是會產生極性強的分解產物，改變固定液極性，在甲基聚硅氧烷固定液中溶解度小，容易引起交聯后的液膜不均勻。過氧化2，4－二氯苯甲酰的分解溫度比過氧化苯甲酰低，是值得推薦的引發劑。

過氧化二異丙苯和過氧化叔丁基分解溫度高，反應活性小。但它們的分解產物為中性，對固定液和柱極性影響不大。

（2）偶氮化合物引發劑：

有偶氮叔丁烷、偶氮叔辛烷、偶氮異丁氰和偶氮叔十二烷。

多種極性和非極性固定液都可由偶氮引發交聯，對固定液不會發生氧化，副產物對柱極性沒有影響。

效果最好的是偶氮叔丁烷和偶氮叔辛烷。

（3）臭氧引發劑：

對OV－1、SE－33、SE－54和OV－215等固定液只需室溫即可交聯固化，對SE－30、OV－1701、SE－52和甲基氰丙基聚硅氧烷等固定液需在50～150℃交聯。

適用于中等極性和非極性固定液的引發交聯，也適用于含有甲苯基或乙烯基固定液的引發交聯。但由于臭氧要滲透到固定液中才能引發交聯，適用于薄膜毛細管柱的交聯。為減少柱子浪費，柱子可先經過評價，選質量好的再通臭氧交聯。這種方法重復性好，設備簡單，無殘留副產物。

4、應用：

廣為應用的一類交聯方法。

三、交聯鍵合法特點：

1、增大粘度，減小柱流失，提高毛細管柱使用溫度，使原來線性的固定液分子變成網狀結構。制備好后，用溶劑把未交聯的低分子物質洗去，提高了固定液的熱穩定性。

2、抗溶劑沖洗，有利于毛細管柱內污染物的清除。

3、防止固定液在毛細管柱中脫落，允許注入大體積稀溶液，不會造成柱超載。

4、固定液交聯形成的網狀結構阻止固定液熱重排。