色譜常見疑難雜癥詳解（二）

  8、做HPLC分析時，柱壓不穩定，原因何在?如何解決?

　　答：原因可能有：a、泵內有空氣，解決的辦法是清除泵內空氣，對溶劑進行脫氣處理;b、比例閥失效，更換比例閥即可;c、泵密封墊損壞，更換密封墊即可;d、溶劑中的氣泡，解決的辦法是對溶劑脫氣，必要時改變脫氣方法;e、系統檢漏，找出漏點，密封即可;f、梯度洗脫，這時壓力波動是正常的。

　　9、做PGS/MS分析時，如何防止焦油狀污染物進入毛細柱?

　　答：聚合物，尤其是一些含氮、硫及鹵素的高分子裂解時，常有焦油狀物質產生。為防止這種焦油狀物質進入毛細柱造成污染而使柱性能下降，可采用保護預柱，即在裂解器與毛細柱之間接一填充預柱，通過控制預柱溫度而使焦油狀物質滯留在預柱內，預注可置于GC氣化室內，這樣既容易控制溫度，又減少系統的死體積，當然，預柱填料需經常更換。

　　10、我最近更換了另一種牌號的ODS柱，雖然分離情況仍可以，但保留時間不能重現，為什么?

　　答：這是因為被分析物可能具有形成氫健的能力。盡管過去幾年來，填料的制造技術有了極大的提高，但不同的廠商的ODS填料表面硅醇基的濃度不同。正是這些硅醇基可能與樣品發生相互作用。因此，同一被分析物中的各組分在不同牌號的ODS柱上的相對保留時間就可能不同。在流動相中加入少量競爭物，如三乙基胺(TEA)，將會使硅醇基的成鍵能力飽和，從而保證不同牌號柱子上的相對保留時間具有較好的重現性。

　　11、我購買的HPLC柱驗收測試時柱壓過高，請問為什么?

　　答：柱壓過高是HPLC柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問題，您可按下面步驟檢查問題的起因：

　　a、拆去保護柱，看柱壓是否還高，否則是保護柱的問題，若柱壓仍高，再檢查;,

　　b、把色譜柱從儀器上取下，看壓力是否下降，否則是管路堵塞，需清洗，若壓力下降，再檢查;

　　c、將柱子的進出口反過來接在儀器上，用10倍柱體積的流動相沖洗柱子，(此時不要連接檢測器，以防固體顆粒進入流動性)。這時，如果柱壓仍不下降，再檢查;

　　d、更換柱子入口篩板，若柱壓下降，說明你的溶劑或樣品含有顆粒雜質，正是這些雜質將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高，請與廠商聯系。一般情況下，在進樣器與保護柱之間接一個在線過濾器便可避免柱壓過高的問題，SGE提供的( U+ W+ D; I7315型過濾器就是解決這一問題的最佳選擇。

　　12、高溫毛細柱的使用壽命一般為多長?

　　答：毛細柱壽命除決定于柱子本身的性能外，在很大程度上取決于使用情況，比如使用溫度、樣品狀態，進樣量等，如果在其使用溫度范圍內，樣品干凈，色譜柱不被污染的情況下，柱子壽命一般在2—3年之間。

　　13、如毛細管柱被污染，柱效和分辨率降低，有何方法使它恢復?是否可通過老化來解決?

　　答：根據柱污染程度可采取不同的方法來解決，如果污染不嚴重，污染物沸點不是太高，可通過老化來解決，但老化溫度不可超過柱子的最高使用溫度，且一般要較長時間(8—30小時)，如果污染較嚴重，或通過老化仍不能使柱性能恢復，那就必須采用溶劑清洗，通常是用5倍柱容積的溶劑(如正戊烷，二氯甲烷等)通過色譜柱。當然，清洗溶劑用的越多，對柱性能的損壞越大，清洗完后，在通載氣老化一定時間，如果柱性能恢復，便可繼續使用。必須指出：只有交聯柱才能清洗，對于非交聯柱，清洗柱會徹底失效，因為固定液被洗掉了，至于清洗用溶劑的選擇，可參考說明書。

　　14、BPX70毛細管柱是否可用于GC/MS分析?

　　答：完全可以，BPX70為極性柱，使用溫度范圍寬(25—260℃)，程序升溫可達290℃，流失低，適合于分析脂肪酸甲酯的各種位置和幾何異構體，藥物異構體，碳水化合物等。因BPX70為交聯住，故用于GC/MS很穩定，污染后可清洗再生。