芎歸湯有效組分抗東莨菪堿致癡呆模型學習記憶能力減退量-效關系研究
水迷宮和跳臺實驗相關文獻：芎歸湯有效組分抗東莨菪堿致癡呆模型學習記憶能力減退量-效關系研究
摘 要 目的：對芎歸湯有效組分抗東莨菪堿致癡呆小鼠學習記憶能力減退的改善作用進行藥效評價，并確定芎歸湯有效組分對抗癡呆模型改善學習記憶藥理學效應的" 量-效" 關系和 ED50，為進一步開展藥效評價提供劑量依據。方法：取昆明種小鼠進行Morris 水迷宮、跳臺篩選訓練，將合格的小鼠 80 只，雌雄各半，按體重隨機分為正常對照組、東莨菪堿致癡呆模型組、藥效劑量 1 ～ 5 組和陽性藥組，實驗前分別給予各自治療藥物，連續給藥 30 天后，除正常對照組外均腹腔注射東莨菪堿造模，30 min 后進行Morris 水迷宮實驗及跳臺實驗，分析比較不同劑量組之間學習記憶能力差異性。結果：小鼠 Morris 水迷宮實驗顯示，芎歸湯有效組分對東莨菪堿致癡呆小鼠學習記憶能力減退有明顯改善作用，可以明顯縮短小鼠水迷宮潛伏期，在 10． 92 ～ 43． 68 g/kg 劑量范圍內均有顯著性差異，且呈現一定的劑量依賴性，其 ED50為 4． 79g/kg。小鼠跳臺實驗顯示，芎歸湯有效組分對東莨菪堿致癡呆小鼠學習記憶能力減退有明顯改善作用，可以延長小鼠跳臺潛伏期和減少跳臺錯誤次數，在 2． 73 ～ 43． 68 g/kg 劑量范圍內均有顯著性差異，且呈現一定的劑量依賴性，其 ED50為 2． 70g/kg。結論：芎歸湯有效組分對東莨菪堿致小鼠學習記憶能力減退有明顯的改善作用，并且隨著劑量的增加藥效越來越明顯，呈現一定的劑量依賴性，具有明顯的" 量-效" 關系。
關鍵詞 芎歸湯有效組分; 東莨菪堿癡呆小鼠; Morris 水迷宮實驗; 跳臺實驗; 學習記憶能力; " 量-效" 關系
阿爾茨海默病( Alzheimer disease，AD) 又稱老年性癡呆，是嚴重威脅著老年人群的身心健康與生命安全的重大疾病。現代研究證實，阿爾茨海默病是一種進行性神經退行性疾病，伴有認知及行為障礙，其發病機制相當復雜，涉及多系統、多環節的異常。由于其起病隱匿、病因不明、治療時間長、治療和護理費用昂貴等原因，己成為世界上繼心臟病、腫瘤和中風之后的第 4 位死亡原因。因此，衰老及抗癡呆藥物的研究已成為老年醫藥學領域的重點，越來越受到人們的關注。芎歸湯是本實驗研制的，由川芎、當歸、淫羊藿組成的具有行氣活血、溫腎強志之功效的中藥復方制劑，但是由于中藥本身成分復雜，作用多樣的藥效學特點，其對不同病因病機引起的癡呆病癥藥效學關系研究較少，因此有必要在經典的東莨菪堿致癡呆模型的基礎上，應用 Morris 水迷宮和跳臺實驗對其進行藥效學相關性研究，研究結果如下:
1 材料
1.1 試驗藥物 川芎、當歸、淫羊藿，分別按照 2010 版中國藥典，經國家中藥創制項目組鑒定為傘形科植物川芎( LigusticumChuanxiong Hort．) 的干燥根莖，批號 20110312; 傘形科植物當歸( Angelia Sinessis( oliv．) Diels) 的干燥根，批號 20110305; 小檗科植物淫羊藿( Epimedium brevicornu Maxim) 的干燥葉，批號20100328。均由安徽世貿醫藥有限公司提供。芎歸湯由川芎、當歸、淫羊藿按照 4: 2: 1 組成( 川芎 24 g，當歸 12g，淫羊藿 6 g，70 kg 人每日用量為 42 g。稱取川芎、當歸適量，適當粉碎后，置于 3000 ml 圓底燒瓶中，加入 12 倍量水浸泡 3h，于電熱套中加熱冷凝回流至揮發油不再增加，收集揮發油，記錄體積( ml) 。藥液于 4 層紗布過濾，收集水提液，濃縮。濾渣加處方比例的淫羊藿適量，置于 3000 ml 圓底燒瓶中，分別加入10 倍、8 量70% 乙醇加熱冷凝回流 2 h 和 1.5 h，6 層紗布過濾，合并兩次醇提液，回收乙醇后濃縮。醇提濃縮浸膏與水提濃縮浸膏混合，再將揮發油與吐溫以 1: 1 比例研磨混勻，加入混合濃縮液中得最終芎歸湯工藝一藥物浸膏，得率: 39． 70%，批號: 2011040101。結合原處方人用量、藥學各部分提取率和藥效預實驗數據，按人日用量以體表面積折算小鼠劑量的 8、4、2、1、0.5 倍為給藥劑量，劑量大小為 43.68 g/kg、21.84 g/kg、10.92 g/kg、5.46g / kg、2.7 g / kg，按等體積不同濃度原則配置，各組灌胃體積均按 25 ml/kg 計算。鹽酸多奈哌齊分散片，規格: 每片含鹽酸多奈哌齊 5 mg，山東羅欣藥業股份有限公司生產，批號: 091243，按人日用量以體表面積折算小鼠劑量的 2 倍為給藥劑量，劑量大小為 1.3mg/kg，按 25 ml / kg 體積灌胃。
1.2 動物 昆明種小鼠，SPF 極，體重 18.0 ～ 22.0g，雌雄各半，SPF 級，由山東大學動物實驗中心提供，合格證號: SCXK ( 魯)20090001。給予 SPF 級普通小鼠飼料飼養( 山東大學動物實驗中心提供，實驗動物配合飼料( 鼠) ，生產許可證號: SCXK( 魯)20090014) 。
1.3 試劑 東莨菪堿氫溴酸鹽，純度 ≥ 99.0% ，蘇州工業園區亞科化學試劑有限公司生產，批號: YK2011031201。臨用時用蒸餾水配置成 2 mg/kg 濃度，按 3 ml/kg 體積腹腔注射給藥。
1.4 儀器 XR-XM101 Morris 水迷宮視頻跟蹤分析系統，上海欣軟信息科技有限公司制造。本系統由水迷宮儀器: 圓形水池直徑120cm，高50 cm，平臺高度20cm，直徑8cm，迷宮上方置有顯示系統攝像機，計算機自動跟蹤并記錄游泳軌跡。XR-3TB 小鼠跳臺測試箱自動記錄系統，上海欣軟信息科技有限公司制造。本系統裝置為一被動回避反射箱，箱底鋪以電柵作為刺激電極，箱內左后角置一個高度和直徑均為 4.5 cm 的圓形平臺為回避電擊的平臺區。
