蘆丁的提取及鑒定——堿酸法

概述

蘆丁（Rutin）廣泛存在于植物界中，現已發現含蘆丁的植物至少在70種以上，如煙葉、槐花、蕎麥和蒲公英中均含有。尤以槐花米（為植物Sophorajaponica的未開放的花蕾）和蕎麥中含量最高，可作為大量提取蘆丁的原料。蘆丁是由斛皮素（Quercetin）3位上的羥基與蕓香糖（Rutinose）〔為葡萄糖（Glucose）與鼠李糖（Rhamnose）組成的雙糖〕脫水合成的苷。

蘆丁為淺黃色粉末或極細的針狀結晶，含有三分子的結晶水，熔點為174~178℃，無水物188~190℃。溶解度：冷水中為1:10000；熱水中1:200；冷乙醇1:650；熱乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于堿而呈黃色。

蘆丁具有維生素P樣作用。有助于保持及恢復毛細血管的正常彈性，主要用作防治高血壓病的輔助治療劑，亦可用于防治因缺乏蘆丁所致的其他出血癥。

實驗目的和要求

1． 實驗目的

①通過蘆丁的提取與精制掌握堿-酸法提取黃酮類化合物的原理及操作。

②通過蘆丁結構的檢識，了解苷類結構研究的一般程序和方法。

③了解UV及NMR在黃酮類化合物結構鑒定中的應用。

2． 要求

①要拿到以下三個化合物：蘆丁、槲皮素、蘆丁的全乙酰化合物。

②能夠拿根據化學試驗及UV、NMR數據初步推斷出蘆丁的結構。并對黃酮類化合物的結構測定有一般性的了解。

試驗方法

1． 蘆丁的提取與分離

2． 蘆丁的鑒定

1）蘆丁的定性反應

取蘆丁3~4mg，加乙醇5~6ml使其溶解，分成三份作下述試驗：

A.取上述溶液1~2ml，加2滴濃鹽酸，在酌加少許鎂粉，注意觀察顏色變化情況。

B.取上述溶液1~2ml，然后滴加2%檸檬酸的甲醇溶液，注意觀察顏色變化情況，在繼續向試管中加入2%ZrOCl2的甲醇溶液，并詳細記錄顏色變化情況。

C.取上述溶液1~2ml，然后再加入10%α-等體積的萘酚乙醇溶液，搖勻，沿管壁滴加濃硫酸，注意觀察兩液面產生的顏色變化。

2）蘆丁的紫外光譜解析

取蘆丁溶于色譜純甲醇中，加入規定的試劑，測定其UV光譜，試解析光譜并初步判斷其結構。

3） 蘆丁的NMR波譜解析

A.蘆丁的三甲基硅醚NMR譜的解析

B.十乙酰化蘆丁的NMR光譜解析

4）蘆丁水解后糖與苷元的鑒定

A.水解方法：精密稱取蘆丁1g（±0.01g），加1%硫酸100ml，加熱40min，放冷靜置，過濾。所得沉淀用少許水洗除酸，干燥稱重，計算苷元與糖的重量比。然后用乙醇（95%大約10ml）進行重結晶，即得苷元。

B.苷元的鑒定：用紙色譜法與對照品對照。

本實驗講解要點及注意事項

①蘆丁提取方法，重點介紹堿-酸法的原理及注意事項。

②定性實驗的目的、意義及注意事項。

③UV及NMR光譜在蘆丁結構檢識中的應用。