外植體的選擇與滅菌:以茴茴蒜莖為外植體,采集健康無病害的茴茴蒜莖,無菌水清洗3遍,在70-75%乙醇中浸泡25-45秒,隨后放入0.1-0.15%的氯化汞2溶液中浸泡5-15分鐘,隨后用無菌水清洗3遍。
愈傷組織誘導:取滅菌后的茴茴蒜莖用無菌手術刀切成長度5-10毫米的小段,接種到愈傷組織誘導培養基上。愈傷組織誘導培養基配方為:MS+6-BA0.3-1毫克/升+NAA0.1-1毫克/升+蔗糖20-40克/升+瓊脂5-8克/升,pH值為5.6-6.0。培養溫度為20-30℃,每天光照0-16小時,光照強度1000-3000勒克斯。
愈傷組織擴大繁殖:無菌條件下,選取綠色或淡黃色無褐變、質地致密的愈傷組織,將其切成邊長為3-8毫米的立方體后,轉接入愈傷組織增殖培養基中。愈傷組織增殖培養基的配方為:MS+6-BA0.5-1.2毫克/升+NAA0.1-1毫克/升+蔗糖20-40克/升+瓊脂5-8克/升,pH值為5.6-6.0。培養溫度為20-30℃,每天光照0-16小時,光照強度1000-3000勒克斯。