設置對照組:
熒光定量PCR檢測一般流程如下圖,選擇檢測靶標基因,進行引物篩選及體系構建,后續進行樣本處理核酸提取,檢測分析結果。
對照組是實驗的監控系統,監測實驗是否有存在異常,也是排除實驗異常關鍵所在;
實驗對照設置: 通常有陽性對照,陰性對照組等。
具體可根據實驗類型進行對照組的設置;對照組是實驗分析的依據,對照組設置的充分合理。
重復試驗:
實驗是否具備重現性是可信度的體現;一般熒光定量PCR都會做3個PCR復孔;不過PCR復孔處于實驗流程的最末端,只是對PCR操作的重復;重復性可設計在逆轉錄、樣本提取等的重復操作,統計得到實驗的重現性。
根據實際情況選擇重復實驗的設置;重復的意義從低到高依次為:PCR復孔,逆轉錄復孔,樣本重復,實驗重復;整個實驗具備重復性說明實驗可信度很好。