熒光定量PCR試劑盒
熒光定量PCR又可以分為TaqMan探針和SYBR Green I熒光染料兩種方法。比較而言,探針雜交技術在原理上更為嚴格,所得數據更為精確;熒光染料技術則成本更為低廉,實驗設計更為簡便。在選擇實驗方案時要根據實驗目的和對數據精度的要求來決定。
1. TaqMan探針法是高度特異的定量PCR技術,其核心是利用Taq酶的3′→5′外切核酸酶活性,切斷探針,產生熒光信號(見下圖)。由于探針與模板是特異性結合,所以熒光信號的強弱就代表了模板的數量。
2. SYBR Green I熒光染料技術原理SYBR Green I是一種只與DNA雙鏈結合的熒光染料(見下圖)。當它與DNA雙鏈結合時,發出熒光;從DNA雙鏈上釋放出來時,熒光信號急劇減弱。因此,在一個體系內,其信號強度代表了雙鏈DNA分子的數量。SYBR Green熒光染料法定量PCR的基本過程是:1、開始反應,當SYBR Green染料與DNA雙鏈結合時發出熒光。2、DNA變性時,SYBR Green染料釋放出來,熒光急劇減少。3、在聚合延伸過程中,引物退火并形成PCR產物。4、聚合完成后,SYBR Green染料與雙鏈產物結合,定量PCR系統檢測到熒光的凈增量加大。
| 產品名稱 | 包裝規格 | 價格(RMB) |
RU640 | Hot Start Fluorescent PCR Core Kit (Taqman) | 50 Reactions | 400 |
RU641 | 100 Reactions | 700 | |
RU642 | Hot Start Fluorescent PCR Core Reagent Kits (SYBR reen I) | 50 Reactions | 400 |
RU643 | 100 Reactions | 700 |
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