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  • 發布時間:2023-09-19 15:43 原文鏈接: 熒光淬滅原理

    熒光淬滅原理如下:

    ①因熒光物質的分子和熄滅劑分子碰撞而損失能量;

    ②熒光物質的分子與熄滅劑分子作用生成了本身不發光的的配位化合物;

    ③溶解氧的存在,使得熒光物質氧化,或是由于氧分子的順磁性,促進了體系間跨越,使得激發單重態的熒光分子轉變至三重態;

    ④當熒光物質濃度過大時,會產生自淬滅現象.

    又稱熒光熄滅或萃滅,是指導致特定物質的熒光強度和壽命減少的所有現象。

    引起熒光熄滅的物質稱為熒光熄滅劑。如,鹵素離子、重金屬離子、氧分子以及硝基化合物、重氮化合物、羧基和羰基化合物均為常見的熒光熄滅劑。

    熒光猝滅是熒光物質分子與溶劑分子之間發生猝滅,熒光猝滅分為靜態猝滅和動態猝滅。利用某種物質對某一種熒光物質的熒光猝滅作用而建立的對該猝滅劑的熒光測定方法,即為熒光猝滅法。

    熒光分子本身濃度增大使其熒光猝滅的現象稱為濃度猝滅或自猝滅。由于熒光的再吸收、熒光物質發生化學變化而觀察不到熒光的現象一般不稱為熒光猝滅。在利用熒光進行定量、液體閃擊計數等包含熒光過程的測定方法中,一定要注意溶劑、共存雜質、氧氣等猝滅劑的影響。

    標記樣品的熒光淬滅是在熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡觀察時遇到的主要問題。由于激光掃描共聚焦顯微鏡具有更強的功率和聚焦更準確的光束,與普通熒光顯微鏡相比,標本的光漂白作用更為明顯,熒光素的熒光可在連續觀察過程中逐漸減弱或消失。

    因此,應考慮使用抗熒光淬滅劑(抗熒光衰減劑)。常用抗熒光淬滅劑有P-苯二胺(Para-phenylene diamine,PPD)、n-丙基沒食子酸鹽(propyl gallate,NPG)、1,4-二偶氮雙環[2,2,2)-辛烷(1,4-diazobicyelo(2,2,2)-octane,DABCO)等。


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