用作報告基因的熒光素酶基因emphasis:role=italiclucemphasis主要來自細菌和螢火蟲。
細菌熒光素酶以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸參與下,使脂肪醛氧化為脂肪酸,同時釋放出光子。螢火蟲的熒光酶在鎂離子、三磷酸腺苷和氧的作用下,催化6-羥基喹啉類物質生成氧化熒光素,同時放出光子。依據上述原理建立的熒光素酶基因的檢測方法簡便、靈敏。
其工作原理如下:將昆蟲熒光素和ATP與表達熒光素酶的植物細胞混合,該酶催化昆蟲熒光素的氧化反應,生成AMP、COsubscript2subscript和光,因此表達熒光素酶的重組植物細胞或組織可用膠片感光的方法進行檢測和示蹤。
例如,將重組植物的葉子表面用砂紙磨損,然后浸入含有昆蟲熒光素和ATP的緩沖溶液中保溫若干時間,晾干,將X光膠片覆蓋在葉子上,則表達昆蟲熒光素酶的部位就會使膠片感光。
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