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  • 發布時間:2023-06-02 14:39 原文鏈接: 熒光素酶實驗(luciferaseassay)通常變化多少倍才算明顯

    Dual-Luciferase?Reporter Assay System E1910

    Dual-Luciferase? Reporter (DLR?) Assay System (Dual-Luciferase? 雙螢光素酶報告基因檢測系統) 為雙報告基因檢測提供有效的手段。 在DLR? 檢測中,螢火蟲(Photinus pyralis ) 螢光素酶和海腎(Renilla reniformis ) 螢光素酶的活性可在單個樣品中依次檢測。首先檢測螢火蟲螢光素酶,將螢光素酶檢測試劑II(Luciferase Assay Reagent II, LAR II)加入樣品中,產生的光信號至少持續1分鐘。定量螢火蟲螢光強度后,再在同一個樣品中加入Stop & Glo? 試劑,將上述反應終止,同時啟動海腎螢光素酶反應。使用帶有試劑自動注射器的發光檢測儀,可在4 秒內完成兩個檢測。在DLR? 檢測系統中,兩個報告基因產生的線性檢測的靈敏度均可達埃摩爾級(<10-18),在實驗宿主細胞內均無內源活性。而且,DLR? 檢測的一體化模式既可快速定量檢測轉染細胞,也可用于快速定量檢測無細胞轉錄/ 翻譯反應體系中的兩個報告基因。

    為了得到Dual-Luciferase? 試劑盒的最佳檢測結果,Promega推薦使用針對該檢測過程進行過確證的發光檢測儀。這些發光檢測儀均帶有DLReady ? 標識。請參閱“通過DLReady ? 確證的發光檢測儀”頁面,來了解相應的儀器信息。

    pGL4 螢光素酶報告基因載體是針對DLR? 檢測系統而設計。組成型表達的海腎螢光素酶載體可與任何實驗用螢火蟲螢光素酶載體聯合共轉染哺乳動物細胞。

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