色譜鑒別法是利用不同藥物在相同色譜條件下,產生各自的特征色譜行為如比移
實鑒值或保留時間進行鑒別試驗。同一種藥物在同樣條件下的色譜行為是相同的,依此可以鑒別藥物及其制劑的真偽。常用的方法有薄層色譜鑒別法、高效液相色譜鑒別法和溶液三氣相色譜鑒別法。
一、薄層色譜鑒別法
薄層色譜法是一種簡便易行的方法,廣泛應用于藥物的鑒別。在實際工作中,一般采用對照品(或標準品)比較法,即將供試品溶液與同濃度的對照品溶液,在同一塊薄層板上點樣、展開與檢視,要求供試品溶液所顯主斑點的顏色(或熒光)
和位置應與對照品溶液的主斑點一致,而且主斑點的大小與顏色的深淺也應大致相同,50m也可以將供試品溶液與對照品溶液等體積混合,應顯示密的斑點。前一種方法具體操作方法及注意事項更常用。
二、高效液相色譜鑒別法
只要供試品在溶劑中具有一定溶解性即能用高效液相色譜法進行檢測,因此應用范圍非常廣泛。《中國藥典》二部采用高效液相色譜法鑒別的品種數量明顯增加。在高效液相色譜鑒別法中,一般按供試品含量測定項下色譜條件進行試驗,要求供試品溶液和對照品溶液主峰保留時間應一致。
三、氣相色譜鑒別法
全部氣相色譜法與高效液相色譜法有很多相似之處,但氣相色譜法要求供試品具有易揮發熱穩定性好等性質,一定程度上限制了氣相色譜法的應用范圍。氣相色譜鑒別法與高效液相色譜鑒別法相似,可以采用與對照品對比,比較供試品與對照品保留時間的方法進行鑒別。
四、其他鑒別方法
生物學鑒別法是利用微生物或試驗動物進行藥物鑒別的方法。如青霉素鈉及其針劑、青霉素鉀及其針劑、玻璃酸酶及其針劑、胰島素等,都是采用生物學法進行鑒別的。此外,《中國藥典》二部還采用其他方法對藥物進行鑒別,如放射性藥物用測定半衰期和能譜的方法進行鑒別,有些藥物如氯霉素及其制劑用旋光法進行鑒別。此外還有紙色譜法、折射率法、顯微鏡及偏光顯微鏡法等。