藥理實驗基礎知識
一、 目的
1. 掌握基本操作,鍛煉動手、動腦能力;
2. 更好地掌握藥理學基本理論知識;
3. 培養科學思維
二、 基本要求
1. 實驗前:預習實驗內容并復習相關理論知識;
2. 實驗時
⑴ 實驗器材要妥善保管;
⑵ 實驗操作按步驟進行,仔細觀察實驗中出現的現象,實事求是地做好記錄;
⑶ 注意節約實驗藥品;
⑷ 維持良好的課堂紀律。
3. 實驗后
⑴ 各組同學將實驗動物處死,實驗臺擦干凈,將實驗方盤送回準備室;
⑵ 值日生搞好實驗室衛生,將死亡動物送至指定場所;
⑶ 書寫實驗報告。
三、 實驗報告的書寫
1. 題目
2. 目的
3. 原理
4. 材料:實驗動物,器材,藥品
5. 方法:用自己的語言簡單扼要描述出來;
6. 結果:要求真實、清楚;
7. 討論:將實驗結果進行比較、分析;實驗中有哪些不足之處;結果異常或失敗的原因;
8. 結論:將實驗結果進行歸納總結,應帶有提示性質。
四、 實驗設計基本原則
1. 隨機原則
使每一實驗對象都有同等的機會抽到實驗組或對照組中,除處理因素外其他因素盡可能均衡一致,從而抵消非實驗因素的影響。
2. 對照原則
⑴ 組間對照:陰性對照,陽性對照,同因素不同水平對照;
⑵ 自身前后對照
3. 重復原則
五、 實驗動物
1. 動物的選擇
⑴ 小白鼠:適用于需大量動物的實驗,如某些藥物的篩選,半數致死量的測定。也較適用于避孕藥實驗、抗炎鎮痛藥實驗、中樞神經系統藥實驗、抗腫瘤藥及抗衰老藥實驗等。
⑵ 大白鼠:比較適用于抗炎藥物實驗,血壓測定、利膽、利尿藥實驗,也可用于進行亞急性和慢性毒性實驗。
⑶ 豚鼠:因其對組胺敏感,并易于致敏,故常被選用于抗過敏藥、平喘藥和抗組胺藥的實驗。也常用于離體心臟、心房、腸管實驗。又因它對結核敏感,常用于抗結核病藥的實驗。
⑷ 家兔:常用于觀察研究腦電生理作用,藥物對小腸的作用。由于家兔體溫變化敏感,也常用于體溫實驗,用于熱原檢查。
⑸ 狗:狗是記錄血壓,呼吸最常用的大動物。還可利用狗做成胃瘺、腸瘺,以觀察藥物對胃腸蠕動和分泌的影響。在進行慢性毒性實驗時,也常采用狗。
2. 實驗動物的編號
狗、兔等較大的動物可用特制的鋁質號碼牌固定在頸部或耳上。大鼠、小鼠如為白色可用黃色苦味酸在不同的體表標志上標記。
3. 麻醉藥的選擇
⑴ 局部麻醉:常采用2%普魯卡因做皮下浸潤注射,可用于局部手術。
⑵ 全身麻醉:
① 吸入麻醉:可將乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩內,利用乙醚揮發的性質,經肺泡吸收,作用較快,適用于小鼠、大鼠短時間麻醉。
② 注射麻醉:常用戌巴比妥鈉和烏拉坦。
4. 動物捉拿及固定方法
⑴ 小白鼠
右手抓住其尾部放在鼠籠蓋鐵紗網上,用左手拇指及食指沿其背部向前抓起頸背部皮膚,并以左手的小指、無名指固定其尾部,便可將小鼠固定在手上。
⑵ 大白鼠
用右手提起尾部,放在粗糙面上,左手的拇指和食指捉其頭部,其余三指夾住背腹部即可固定。
⑶ 豚鼠
豚鼠性情溫和不咬人,用手握住軀干即可。、
⑷ 家兔
可用一手抓住家兔頸背部皮膚,將兔提起,另一手托其臀部,使兔呈坐位姿勢。在進行仰位手術操作時,可用繩帶將其四肢仰位捆綁在兔手術臺上。頭部用兔頭固定夾固定。
5. 動物的給藥方法
⑴ 小白鼠
① 灌胃法(i.g.):以左手固定小鼠后,使其腹部朝上,頸部伸直。右手持配有灌胃針頭的注射器,自口角插入口腔,再從舌面沿上腭進入食道。小鼠灌胃容量一般為0.1~0.3m1/10g。
② 腹腔注射(i.p.):以左手固定小鼠,方法同灌胃,右手持注射器,取30度角將針頭從下腹部向頭端刺入腹腔。進針部位不宜過高,刺入不宜太深,以免傷及內臟。小鼠腹腔注射量一般為0.1~0.3ml/l0g。
③ 皮下注射(s.c.):用左手固定小鼠后,右手持注射器于拇指和食指捏起的皮膚處進針即可。
④ 靜脈注射(i.v.):將小鼠置于特制的固定筒內或倒置的大漏斗下,讓其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部,或將鼠尾在50'C熱水中浸泡半分鐘使血管擴張。左手拉尾端,右手持注射器將針頭刺入尾靜脈,推入藥液。
⑵ 家兔
① 灌胃:需兩人合作進行。一人取坐位用兩腿夾持兔身,左手握家兔雙耳,右手抓住兩前肢。另一人將木制開口器橫插家兔口內,壓住舌頭并固定之。取8號導尿管從開口器中部小孔插入食道。插管時如誤入氣管會出現動物的掙扎和呼吸困難。也可將導尿管的外端浸入水中,如有氣泡吹出,表示插在氣管內,此時應拔管重插。當判明導尿管在食道以內后,用注射器接通導尿管將藥液推入。
② 皮下、腹腔注射:給藥方法基本上同小鼠,唯針頭可稍大,給藥量可稍多。皮下與肌內為0.5~1.0/mg,腹腔為1.0~5.0ml/mg。
③ 靜脈注射:將家兔置固定箱內,撥去耳殼外緣的毛,選擇一條比較明顯的耳緣靜脈,用酒精棉球涂擦皮膚,使血管顯露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部,食指墊在兔耳注射處的下面,右手持注射器,將針頭從近耳尖處刺入,當確認針頭在血管中后,將藥液推入。
1. 動物的處死:大、小鼠通常用頸椎脫臼法處死。