基本方案
| 實驗方法原理 |
GOD,β-D-葡萄糖:氧1-氧化還原酶。 酶實驗是通過與過氧化物酶(POD)偶聯的一個反應序列中進行的,其供體是鄰聯二茴香胺:
|
|---|---|
| 實驗材料 | 過氧化物酶 |
| 試劑、試劑盒 | 磷酸鉀 鄰聯二茴香胺 葡萄糖 |
| 儀器、耗材 | 分光光度計 |
| 實驗步驟 |
實驗所需「試劑」具體見「其他」 0.98 ml 實驗混合物
0.02 ml 酶樣品 記錄在 25℃ 時 436 nm 處吸收值降低。ε436=8300 l/(mol·cm)。
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| 注意事項 | |
| 其他 |
試劑: 0.1 mol/L 磷酸鉀,pH7.0 鄰聯二茴香胺[二氯化鄰聯二茴香胺,Mr=317.2, 是固態致癌物,準備 1 ml 25 mmol/L 水溶液(7.9 mg/ml) 并且溶于 100 ml 0.1 mol/L 磷酸鉀 pH 7.0,用 O2 使其飽和 10 min] 0.5 mol/L 葡萄糖(Mr=180.2,90 mg/ml) 過氧化物酶(POD, 從山葵中提取,使用前用 0.1 mol/L 磷酸鉀 pH 7.0 稀釋至 120 U/ml)
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