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  • 發布時間:2022-11-10 16:06 原文鏈接: 薄層層析的定量分析方法介紹

    洗脫測定法

    ①洗脫測定法,將展開后的組分斑點處的吸附劑刮下,用適宜溶劑將組分洗脫溶出,然后用適當方法進行定量測定。常用方法為比色法、紫外-可見分光光度法,也可用電化學分析法等。


    原位掃描法

    ②原位掃描法,將展開后的薄層板放在光密度計內,以一定波長的光照射,同時使斑點移過光路,由于斑點對光的吸收,可繪出峰形曲線,由峰面積與標準樣品的吸收相比較而求出含量。


    薄層層析法

    薄層層析法以吸附層析使用最為普遍。常用的吸附劑為硅膠、氧化鋁等。薄層層析和其他層析法一樣,除吸附法外,也可進行分配、離子交換、分子排阻等機理的層析,即將鋪制薄層的材料相應換為涂以固定相的載體、離子交換劑、凝膠等,其操作與吸附法基本相同。

    制板 鋪制薄層板時,要求基底板潔凈平整,可用干法或濕法鋪制。現常用濕法制板,即將吸附劑和粘合劑(如燒石膏)按一定比例混合,加入適量水調勻,用涂布器將此勻漿緩慢地移過基底板,放置晾干,再經適當烘烤活化后即可使用。如不加粘合劑和水,直接將吸附劑均勻地鋪成薄層,則為干法制板。現在市場上已有各種制好的薄層板出售,統稱預制板。

    展開 有多種方式,以上行法最為常用。將薄層板垂直或傾斜放置,將展開溶劑加于低部,使之自下向上移動。下行法則為用濾紙將溶劑引至薄層上端,使其自上向下流動。平行展開時,將板平放,溶劑被吸上至薄層板點有樣品的一端,進行展開。使用圓形薄層板時,將樣品點在圓心附近,使溶劑自圓心向圓周方向移動,稱為環形展開或徑向展開;將樣品點在圓周位置,使溶劑自圓周向圓心移動的為向心展開,適用于f值大的組分的分離。將點樣品處附近的吸附劑刮去,使溶劑只能通過樣品點附近的較窄部分前進展開,因而溶劑前緣呈弧形的展開方式,也稱徑向展開,這種方式對較難分離的組分可能效果好些。



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