薄層色譜的實驗流程

　　 顯色 計算Rf值

　　鋪板 取7.5x2.5cm左右的載玻片5片，洗凈晾干。在50mL燒杯中，放置3g硅膠G，逐漸加入0.5﹪羧甲基纖維素鈉水溶液(CMC)8mL，調成均勻的糊狀，涂于上述潔凈的載玻片上，用手將帶漿的玻片在水平的桌面上做上下輕微的顛動，制成薄厚均勻、表面光潔平整的薄層板，涂好的硅膠G的薄層板置于水平的玻璃板上，在室溫放置0.5h后，放入烘箱中，緩慢升溫至110℃，恒溫0.5h后取出，稍冷后置于干燥器中備用。

　　點樣點樣用的毛細管為內徑乙醚、丙酮、乙醇、四氫呋喃等）配成溶液。點樣前，可先用鉛筆在小板上距一端5mm處輕輕劃一橫線，作為起始線，然后用毛細管吸取樣品在起始線上小心點樣，如需重復點樣，則應待前次點樣的溶劑揮發后方可重點。若在同一塊板上點幾個樣，樣品點間距離為5mm以上。

　　展開劑的選擇主要根據樣品的極性、溶解度和吸附劑的活性等因素來考慮。薄層的展開在密閉的容器中進行。先將選擇的展開劑放入廣口瓶中，使廣口瓶內空氣飽和5－10min，再將點好試樣的薄層板放入廣口瓶中進行展開，點樣的位置必須在展開劑液面之上，當展開劑上升到薄層的前沿（離前端5~10mm）或多組分已明顯分開時，取出薄層板放平晾干，用鉛筆劃溶劑前沿的位置后，即可顯色。

　　顯色如果化合物本身有顏色，就可直接觀察它的斑點。如果本身無色，可先在紫外燈光下觀察有無熒光斑點（有苯環的物質都有），用鉛筆在薄層板上劃出斑點的位置；對于在紫外燈光下不顯色的，可放在含少量碘蒸氣的容器中顯色來檢查色點（因為許多化合物都能和碘成黃棕色斑點），顯色后，立即用鉛筆標出斑點的位置。

　　計算Rf值準確地找出原點，溶劑前沿以及樣品展開后斑點的中心，分別測量溶劑前沿和樣點在薄層板上移動的距離，求出其Rf值。