溶劑蒸氣的作用：溶劑蒸氣在薄層色譜中起著重要作用，它和液相(展開劑)、固定相(吸附劑)一起構成了一個作用機制復雜的三維層析過程。
溶劑的質量：展開劑中溶劑的質量直接影響薄層色譜分離能力。如果含有雜質超標、水分超標以及吸收空氣中干擾氣體等，均可影響分離結果。如甲酸乙酯遇水容易水解，如用多次開瓶的殘存溶劑，因逐漸吸收大氣中的水分而不同程度地分解，所得的色譜與用新鮮溶劑所得色譜有明顯差別。展開劑展開后，溶劑比例發生變化，勿重復使用。
