蛋白體外表達純化

實驗目的：獲得目的蛋白的粗蛋白，構建反應體系；

表達載體：pLM303；

步驟：

     1.挑菌小搖，5 ml，37℃過夜；可保菌；

      2.取1 ml加到30 ml LB k+培養基中，37℃，約1.5 h，到OD600約為0.6；

      3.取2 ml 作為IPTG加入之前的對照；加入IPTG至終濃度2.5 mM（1 M IPTG母液加75 ul 到30 ml 培養基中），28℃，180 rpm，培養5小時；

      4.菌液可以4 ℃保存20天左右；

      5.取1 ml超聲破碎，取上清，SDS-PAGE檢測蛋白是否表達；利用IPTG加入之前的菌液破碎之后的上清作為對照；