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  • 發布時間:2022-01-18 14:59 原文鏈接: 蛋白聚集體的檢測

    1. 可溶聚集體

    最小的可溶聚集體是二聚體,可溶聚集體的大小上限則因蛋白質和溶液條件而異。這些可溶的蛋白聚集體,無論是通過物理相互作用還是化學修飾,通常可以用SEC-HPLC檢測。該方法的局限在于樣品在層析柱中的稀釋可能會導致聚集體的解離、不同蛋白質需要不同的流動相、同時流動相或高壓也可能會誘導蛋白質形成聚集體。

    除此之外,其他的一些可以檢測蛋白質聚集體的方法有原位動態光散射、原位靜態光散射、分析超離心法、原子力顯微鏡、石英晶體微天平、電噴霧-差分電遷移率分析等。

    2. 不可溶聚集體

    一般來說,不可溶聚集體包括亞可見微粒(<100 μm)和各種形式的可見聚集體或顆粒。可見顆粒體/聚體的形貌取決于聚集機制和或實驗條件(如溶液pH)。

    傳統的檢測亞可見微粒的方法是光屏蔽法,但其在檢測半透明顆粒和特征尺寸小于2 μm的顆粒方面能力有限。流動成像分析因為其高的靈敏度、形態信息及可區分某些類型的顆粒而被廣泛應用于聚集體的檢測。


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