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  • 發布時間:2021-04-26 16:38 原文鏈接: 血漿凝血酶原時間測定操作規程(檢驗SOP)(一)

    一、項目名稱:
    血漿凝血酶原時間測定(prothrombin time ,PT)

    二、檢驗方法名稱:
    凝結法

    三、方法學原理:
    在確定量的血漿樣本經過一定時間的加溫后,加入試劑。加入試劑后,采用波長為660nm的光照射樣本。凝血過程(纖維蛋白原轉化為纖維蛋白)中血的渾濁度可以通過測量散射光光強度的改變來測定。從散射光光強度的測定,可以做出凝血曲線,通過Percentage Detection Method法求得凝血時間。

    四、方法學溯源:
    凝血酶原時間(PT)測定是Quick于1935年創立的。在受檢血漿中加入過量的組織凝血活酶(人腦、兔腦、胎盤及肺組織等制品的浸出液)和鈣離子,使凝血酶原變為凝血酶,后者使纖維蛋白原轉變為纖維蛋白。觀察血漿凝固所需要的時間即凝血酶原時間。其凝固時間取決于凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅰ的水平。該試驗是反映外源凝血系統最常用的篩選試驗。

    五、儀器:
    (一)型號:Sysmex  CA—1500自動血液凝血分析儀
    (二)分析和計算參數:
    1.處理量:約120個測試/小時
    2.所需樣本量:50μl
    3.檢驗時間:在最長檢驗時間之內測出結果,典型最長檢驗時間:100秒
    4.重復性:CV≤2%
    5.計算參數:凝血酶原活動度(PT%)
                 凝血酶原比值(PT R)
                 國際標準化比值(INR)

    六、試劑及配套品:
    (一)試劑:
    1. 凝血活酶含鈣試劑(Thromborel? S)
    (1)商標:德靈(DADE BEHRING)
    (2)包裝規格:Pack for 10×4ml
    (3)代碼:No.OUHP 29 , or
    (4)參數:ISI(國際敏感度指數)=0.97
    (5)成分:
    1)Thromborel? S  Reagent :
    a. 凍干人胎盤促凝血酶原激酶(lyophilized human placental thromboplastin)
    b. 氯化鈣 (calcium chloride)
    c. 穩定劑 (stabilizers)
    2) 防腐劑(Preservatives):
    a.慶大霉素(Gentamicin)(0.1g/L)
    b. 5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮和2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(5-chloro-2-methyl-4-isothiazol-3-one and 2-methyl-4-isothiazol-3-one)(最大量 20mg/L)
    2.佛羅那巴比妥緩沖液(Dade? Owren'S  Veronal Buffer)
    (1)商標:德靈(DADE BEHRING)
    (2)包裝規格:Pack for 10×10ml
    (3)代碼:B4234-25
    (4)成分:
    1)2.84×10-2M的巴比妥鈉 (sodium barbital)
    2)1.25×10-1M的氯化鈉 (sodium chloride)
    3) PH 7.35±0.1
    3. 清洗液(Cleaning)
    2%次氯酸鈉溶液(自配)
    (二)配套品:
    1.標準血漿(Standard Human Plasma)
    (1) 商標:德靈(DADE BEHRING)
    (2) 代碼:No. ORKL
    2.校準質控血漿(Ci-Trol?)
    (1) 商標:德靈(DADE BEHRING)
    (2) 代碼:Level 1, B4244-10
              Level 2, B4244-20
              Level 3, B4244-30
    3.質控血漿(Control Plasma)
    (1) 商標:太平洋(Pacific Hemostasis)
    (2) 代碼及規格:Level 1 (Normal), 100595  10×1ml
                    Level 2 (Abnormal), 100596  10×1ml
                    Level 3 (Abnormal), 100597  10×1ml


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