實驗步驟
1、血培養瓶經 12-18 h 35℃ 孵育后,在血平板或巧克力平板上盲目傳種一次。這種方法可提早檢出陽性標本。
2、盲目傳種后,培養瓶繼續孵育至第 7 天,每日早晨取出檢查有無生長,并搖勻培養液續孵。下列幾種情況提示細菌生長。
(1)均勻混濁,發酵葡萄糖產生氣泡。
(2)微混濁有綠色變化。
(3)血球層上面出現顆粒狀或絮狀沉淀物生長,或自下而上的嚴重溶血。
(4)混濁并有膠凍狀凝固,瓶壁有顆粒狀粘附。
(5)表面有菌膜,菌環狀生長,下呈混濁。
3、肉眼見有細菌生長,做如下處理:
(l)取生長物涂片,做革蘭氏染色。
(2)取生長物做藥敏試驗(直接試驗)。
(3)取生長物做相應的生化鑒定。
(4)取生長物移種血平板,巧克力和中國蘭/麥康凱/伊美蘭平板。根據革蘭氏染色所見結果應及時報告臨床醫師。
根據革蘭氏染色的結果,以培養瓶內培養液為菌液,做直接法藥物敏感性測定,爭取在較短時間內得出初步結果,供臨床醫師作為治療的參考。標本經平板分離純培養后,做標準化藥敏試驗,正式報告給臨床醫師。
涂片結果證實為一種細菌生長,則可直接以增菌液做鑒定試驗。如有二種或多種細菌同時生長,則必須經過分離培養,以獲得純菌后做鑒定。
4、無細菌生長表現的培養瓶,在觀察的 7 天中,最少應作 2 次盲目傳種。7 天仍未見生長,報告陰性。如可疑布氏桿菌時可培養 28 天,可疑軍團病菌時可培養 10 天。
5、需氧菌培養可轉種到血平板或巧克力平板。用血平板可觀察到細菌溶血的情況,但可能丟失嗜血桿菌。如用巧克力平板,不僅嗜血桿菌可生長,腦膜炎奈瑟菌生長也好。轉種巧克力平板需放 CO2 環境中。 展 |