血液科醫生常說的“流式”，你知道是什么嗎？

　　臨床常說的“流式”是流式細胞術(flow cytometry)的簡稱，因其檢測在液體中移動的細胞或粒子而得名。具體來說，單個細胞懸液中加入一個或多個熒光標記的抗體，抗體通過抗原抗體反應與細胞上的抗原結合。在流式細胞儀中，細胞在鞘液中單個流動，就像紅細胞單個通過毛細血管一樣通過檢測口，儀器發出一個或多個激光束激發標記在細胞上的熒光物質。從熒光物質發出的光被收集、分離、檢測，其數據被傳輸到控制流式細胞儀的計算機供分析。

　　流式的臨床應用

　　在臨床上，流式細胞術被用于精確檢測異常細胞群，如對血液系統腫瘤進行診斷和分型，或在HIV感染時檢測CD4+T淋巴細胞。流式細胞術也可用于檢測生理過程，例如移植前干細胞計數（CD34陽性細胞計數）或組織相容性測試。

　　流式為什么能夠檢測疾病？

　　在正常細胞分化成熟過程中，不同的抗原會在其表面或內部出現或消失，通過檢測這些抗原的存在或缺失，我們能夠確定細胞的種類和發育階段。這些在白細胞表面的抗原，又稱為白細胞分化抗原或簇分化抗原 (cluster of differentiation, CD)。疾病情況下，例如白血病時，本來數量很少或本不應該出現的原始細胞，大量出現在骨髓或外周血中，通過檢測這些細胞CD分子表達情況，可以準確知道這些細胞的類型，以便進行診斷和治療。臨床常用的CD分子見下表。

　　流式最大的優點就是特異性和敏感性都很好，并且檢測起來速度很快。

　　WHO血液系統腫瘤的分類基于：形態學(morphology)、免疫表型(immunophenotype)、遺傳學異常(genetic abnormalities)和臨床特征(clinical features)的。

　　一些造血系統腫瘤具有特異性的免疫表型，在缺乏免疫表型檢測的情況下診斷非常困難。因此懷疑血液系統惡性腫瘤的標本應該通過流式細胞術或免疫組織化學檢測免疫表型。與免疫組化檢測相比，流式具有更高的靈敏度，主觀性更低，也更快速，在幾個小時內就能夠對白血病進行分型。在評估血液系統疾病是否能夠使用單克隆抗體治療或其治療效果時，流式也具有明顯的優勢，因為單抗的靶抗原必須在細胞表面表達，才能治療有效。

　　流式的標本要求

　　液體標本是流式細胞儀的理想標本類型，外周血和骨髓標本是最常見的，使用枸櫞酸鈉和EDTA抗凝均可，即使用綠頭或紫頭抗凝管采集流式標本。胸水、腹水、腦脊液也是很常見的標本類型，因為這些標本中細胞數量可能比較少，送檢標本量要盡可能的多一些。當然，能夠獲得單細胞懸液的固體組織也是可以進行檢測的。流式檢測的是細胞表面的抗原，標本新鮮很重要，最好在24h內送檢，室溫保存即可。

　　需要注意的是，慢性粒單核細胞白血病(Chronic myelomonocytic leukemia, CMML) 和陣發性睡眠性血紅蛋白尿(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, PNH) 檢測一定要使用外周血標本，而想要診斷骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndromes, MDS)，最好使用骨髓標本。

　　流式檢測在血液病中起什么作用？

　　血液病患者的整個病程中需要多次進行流式檢測：初診時需要流式幫助確診和分型，病程中需要流式監測治療效果，骨髓移植時需要流式對供者細胞進行CD34陽性細胞進行準確計數，化療或者骨髓移植完全緩解后需要流式進行微小殘留病變(minimal residual disease, MRD)的檢測。同時，流式還可以通過抗原表達模式的不同進行疾病診斷。