在二十世紀五十年代,美國庫爾特發明血細胞分析儀,且發展較快,在醫院得到了大范圍的推廣應用,為醫護人員的診斷提供了科學的數據支持,因此血液細胞分析儀在我國疾病診斷中占據非常重要的位置[1]。目前我國血液細胞分析儀計量檢定所使用的標準是我國1990年頒布的《血細胞分析儀》,以作為血液細胞分析儀計量檢定的性能指標。但是在實際操作過程中,血液細胞分析儀常出現細胞計數不正確的現象,筆者對血液細胞分析儀計量檢定影響因素進行分析,希望對其他工作人員有所幫助。
1血液細胞分析儀計量檢定的必要性
血液細胞分析儀在正常操作的過程中,會受到多種因素的影響,影響血液細胞分析儀監測結果的準確性,因此在血液細胞分析儀使用的過程中,要對血液細胞分析儀計量檢定,以保證檢測結果的準確性與可靠性,從而提高相關工作的有效性,不同型號的血液細胞分析儀有其相對應的檢定指標存在,綜合我國存在的多個血液細胞分析儀檢定指標,現總結如下:①紅細胞(RBC)計數的準確性在±6%之間;②白細胞(WBC)計數的準確性在±10%之間;③血紅蛋白(Hb)計數的準確性在±(3+3%×C)g/L之間;④血小板(PLT)計數的準確性在±10%之間;⑤上述四種血液細胞的重復性低于3%[2]。
2血液細胞分析儀計量檢定的影響因素
2.1血液細胞分析儀檢測技術的限制
一般情況下,血液細胞分析儀有以下幾部分組成:電學細胞、計算機控制系統、機械系統以及細胞檢測系統[3],最重要的是細胞檢測系統,嚴重影響細胞技術結果的準確性,而我國現階段使用的血液細胞分析儀檢測技術主要是光散射檢測與電阻抗檢測。由于兩種檢測技術的限制,不能很好的分辨各種細胞,因此會影響血液細胞分析儀的檢測結果,影響白細胞的檢測或者是血小板,且隨著科學技術的不斷進步,阻抗技術的不足日漸明顯。而光散射檢測技術對細胞的分類更為仔細,還可以與比色法[4]進行綜合,有效提高了血液細胞分析儀檢測結果的準確性,但是費用較高。
2.2血液細胞分析儀試劑的不良影響
血液細胞分析儀在使用過程中,主要會用到清洗劑、溶血素和稀釋液三種試劑,其中清洗劑主要是對血液細胞分析儀進行清洗,以清除污染,由于不同血液細胞分析儀設計理念的區別,因此清洗劑的使用并不是一成不變,需要工作人員根據血液細胞分析儀的具體情況,選擇使用清洗劑的最佳時機。通常情況,清洗劑中存在著活性酶,能夠去除血液細胞分析儀管道與計數池中存在的污染物,且效果明顯,但是清洗劑的保質期較短,如果工作人員為了節省資金成本投入,一味的選用質量較差的清洗劑的話,會促使血液細胞分析儀中的管道向著硬、變色以及堵塞的方向發展,導致檢測結果的變化,且誤差較為明顯[5];溶血素主要是針對血液中的紅細胞來說的,將紅細胞逐漸溶解,為白細胞的計數提供便利,但可以導致白細胞膜出現穿孔,白細胞中的胞漿流失,而溶血素主要是通過空白值、吸光度、吸收峰波長以及PH值來體現。吸光度、吸收峰波長會影響比色法的使用效果,最后影響血紅蛋白的檢測結果出現誤差,一旦溶血素的使用效果不徹底,就會導致部分的紅細胞被當做是白細胞來使用,導致白細胞的計數結果出現極大的誤差,也就是說溶血素的使用會嚴重影響白細胞與血紅蛋白的計數結果;稀釋液主要是對血液細胞來稀釋,以降低血液細胞出現粘連與聚集的幾率,穩定血液細胞的理化指標,但是稀釋液的理化指標受到血液細胞分析儀型號的影響,從而嚴重影響血液細胞分析儀的檢測結果。在稀釋液使用的過程中,如果稀釋后的血液細胞長時間的放置后,會產生較為明顯的分層,影響溶液的穩定性。
2.3標準物質的影響
在血液細胞分析儀計量檢定工作開展的過程中,可以通過紅細胞的微粒標準物質來實現紅細胞的檢定,白細胞的微粒標準物質來實現白細胞的檢定,都是以電阻法原理為基礎。如果血液細胞分析儀中的計數結果顯示是0的話,則說明沒有通用性,而血紅蛋白的微粒標準物質已經停止生產。但是目前我國所使用的血液細胞溶液標準物質需要嚴格按照規定的要求進行,以避免對標準物質的損傷,從而導致血液細胞分析儀檢測結果存在誤差。
標準物質在運輸過程中會受到多種因素的影響,例如震蕩明顯對擠壓紅細胞,導致紅細胞出現破裂或者是變性,從而導致血紅蛋白的釋放,而運輸時間過程的話,溫度又無法受到保障,一般情況下,運輸溫度需要保持在2―8℃,且需要使用運血箱,能將血液維持2天2夜,一旦溫度高了,就會造成溶血現象的出現。而標準物質在使用過程中,工作人員在取出后,應立即蓋上蓋,并將溫度控制在2―8℃之間[6],工作人員可以連續使用10d,將標準物質對血液細胞分析儀計量檢定結果的影響控制在最小化,以減小誤差的存在。
2.4計量檢定操作
在血液細胞分析儀計量檢定的過程中,工作人員最好選擇使用全血模式,以有效降低血液細胞的重復性,以確定稀釋液與樣品量之間的關系。而在標準物質的測量之前,需要血液細胞分析儀對細胞的基數進行檢測。而血液細胞分析儀在安裝與使用的過程中,會出現地線安裝不當、接頭松動的現象,會對血液細胞的計數結果產生影響,尤其是地線連接問題尤為明顯,工作人員需要及時的查清原因,并對血液細胞分析儀進行清洗與調整,重新進行地線的安裝,以保證血液細胞分析儀符合規定的要求。
而在使用環境中,溫度會直接影響血液細胞分析儀計量檢定的結果,特別是溫度較低的話,會導致血液細胞發生異變,出現凝聚的現象,因此為了降低溫度對血液細胞分析儀計量檢定結果的影響,將環境溫度控制在15―35℃的范圍內。灰塵也會嚴重影響血液細胞分析儀計量檢定的結果,尤其是在血小板計數中,容易將灰塵當成是血小板來看待,導致血小板的計數結果偏高。因此血液細胞分析儀在存儲過程中要保證環境的清潔性,并定期進行打掃,以保證探頭的清潔性,降低對血液細胞分析儀計量檢定結果的影響程度。工作人員還要注意電信號、噪音、磁場以及電壓等對血液細胞分析儀的影響,提高血液細胞分析儀計量檢定結果的準確性。
結語:
綜上所述,血液細胞分析儀在計量檢定的過程中,受到多種因素的影響,因此工作人員要嚴格按照規定的要求執行和操作,以有效降低影響因素的影響力,提高血液細胞分析儀計量檢定的準確性。