血液DNA提取試劑盒血液DNAout

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中文名稱：血液DNA提取試劑盒

英文名稱：血液DNAout

產品編號：3671

產品類別：分子生物學

生產廠家：國產

產品價格：90元

產品規格：10 次(簡裝)

產品介紹：

本產品用于提取新鮮或冷凍的動物(包括禽類)及人抗凝全血基因組DNA。

性能指標：

1.DNA純凈,OD260/280在1.8-2.0之間。不含蛋白質和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、雜交等。DNA產量為30-50 ml/mL全血。

2.操作簡單,整個過程約15分鐘,室溫操作,適合大規模樣品處理。血液處理量可達1 mL,不需要柱子,不會發生其他同類產品經常發生的堵塞現象。

3.價廉物美,與國外同類產品相比質量相當,但價格只有其一半左右。

4.安全無毒,本試劑盒對人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味。

使用方法：

將20-200 mg克剪碎的組織或0.1-1 ml血液直接加到0.75 ml溶液A中短暫勻漿，65℃保溫5分鐘后15000 g離心1分鐘，上清尤氳忍寤芤?SPAN lang=EN-US>B混勻, 冰浴2分鐘,15000 g離心1分鐘，上清加入等體積的氯仿(自備)混勻后15000 g離心5分鐘,最后用等體積異丙醇沉淀上清得到DNA沉淀，用1 ml 75%乙醇(自備)清洗2次后將沉淀溶于緩沖液中待用。

實驗數據：

圖一:血液DNAOUT效果圖

圖注：用本產品提取1 ml兔全血(左圖)和0.1 ml抗凝雞全血(抗凝劑:血液=1:1)得到的DNA(中圖),得到的DNA分別溶于50 ml和250 ml TE后取10 ml上樣,在0.8%瓊脂糖凝膠和1 X SuperBuffer中300 V電泳10分鐘后直接在UV燈下照相。M為全長l 嗜菌體DNA。按國內某試劑盒提取方法提取0.2 ml雞血,柱子在離心后被堵, 實驗失敗(右圖)。

表一: 血液DNAOUT與國內某試劑盒提取血液DNA數據比較

260/280產率

兔全血1.61(3)16.58(3)

雞全血1.82(3)626.8(3)

鴨全血1.83(3)948.71(3)

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血液DNAOUT 提取試劑盒使用說明

一: 血液DNAOUT 提取試劑盒簡介

適用對象 新鮮或冷凍的動物及人抗凝全血基因組DNA的提取。

作用原理 所含去污劑裂解細胞并釋放出DNA,所含DNase抑制劑能抑制DNase的活性,所含去蛋白劑能清除血液細胞中所含的蛋白質成份。所含RNase能去除RNA的污染。

試劑盒成份 “溶液A”,“溶液B”和“溶液C”。

性能指標 DNA產量與國內同類產品相當。

使用優點 操作簡單 整個過程約15分鐘,室溫操作,適合大規模樣品處理。

DNA純凈 獲得的DNA純度高，可直接用于PCR、酶切、雜交等。

價廉物美 與國外同類產品相比質量相當，但價格便宜一半左右。

安全無毒 本試劑盒對人體無毒，無腐蝕性和刺激性氣味。

物理特性 2-8℃保存,保存期限為12個月。

自備試劑 氯仿,異丙醇，75%乙醇。

二: 血液DNAOUT的使用

1. 在1ml抗凝全血中加入0.5ml“溶液A”(冷凍血需先37℃水浴融化)，吹打混勻。

2. 室溫離心15000rpm，2分鐘，沉淀呈紅色。小心傾去上清。

3. 再加入1ml“溶液A”，輕柔的吹打混勻，使細胞完全分散。

4. 室溫離心15000rpm, 2分鐘，沉淀呈粉白色。傾去上清。

5. 加入0.6ml“溶液B”(用前搖勻)，用1ml吸頭徹底吹打混勻。

6. 68℃水浴10分鐘(此步可省略，但產量略有降低)。

7. 加入0.2ml氯仿和0.3ml“溶液C”，立即小心的顛倒混勻。

8. 室溫離心15000rpm,3分鐘，小心將上清(約0.7ml)轉移至一新的離心管中，加入等體積異丙醇，輕柔的顛倒混勻5-8次，此時出現絮狀DNA沉淀。

9. 室溫離心15000rpm，1分鐘，去盡上清。

10. 加入75%乙醇洗滌沉淀，室溫離心15000rpm，1分鐘。

11. 重復步驟10。

12. 室溫干燥DNA沉淀10分鐘，加入TE緩沖液0.1-0.3ml。65℃水浴10分鐘溶解DNA，中速振蕩5秒混勻。