(1)比色法:ALP在堿性條件下使磷酸苯二鈉水解,生成磷酸和游離酚,后者與4-氨基安替比林作用,并經鐵氰化鉀氧化成紅色醌類化合物,其顏色的深淺與ALP活性成正比。
(2)連續監測法:ALP在堿性條件下,使磷酸對硝基苯酚(4-NPP)釋放出磷酸基團,AMP參與磷酸酰基的轉移,促進酶反應速率,生成游離的對硝基苯酚(4-NP),并形成黃色的醌,其吸光度的增高速率與酶活力成正比。