血清葡萄糖測定實驗

一、實驗試劑：

l、lmol／L磷酸鹽緩沖液（PH7.0）：溶解無水磷酸氫二鈉8.67g及無水磷酸二氫鉀5.3g于800ml蒸餾水中，用lmoL/L氫氧化鈉或鹽酸調節PH值至70，然后用蒸餾水稀釋至1L．

2、酶試劑：取葡萄糖氧化酶1200W 過氧化物酶1200w，4-氨基安替比林10mg，疊氮鈉10Omg，加上磷酸鹽緩沖液至80ml左右，調節pH7.0加磷酸鹽緩沖液到100ml，置冰箱保存，至少可穩定三個月。

3、酚溶液：重蒸餾酚100mg溶于100ml蒸餾水中，貯存棕色瓶中．

4、酶酚混合試劑；酶試劑和酚溶液等量混合，在冰箱內可以存放一個月．

5、葡萄糖標準應用液（5.6mmol/L）

二、操作：

取數支16mmm×100mm試管，按下表進行操作。



混勻，置37℃水浴中，保溫15min，用分光光度計，波長505nm，比色杯光徑1.0cm，以空白管調零，分別讀取標準管及測定管吸光度。

三、計算：

血清葡萄糖mmol/L＝測定管吸光度/標準管吸光度

參考值：空腹血清葡萄糖為3.89－6.11mmol／L

1、新配制的葡萄糖標準液主要是α型，故需放置2h以上（最好過夜），待等適衡后方可應用．

2、葡萄糖氧化酶催化反應的最適PH范圍（6.5－8.0），但當PH低至6.6時，反應終點的吸光度略有下降，選用PH7.0土0.1．

3、由于溫度對本法影響較大，故試劑從冰箱取出達到室溫時，再進行測定．

4、測定樣本以草酸鉀－氟化鈉為抗凝劑的血漿為好。