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  • 發布時間:2022-11-16 16:31 原文鏈接: 血清醛縮酶的檢查過程

      1、比色法:

      ①0.1mol/L三甲基吡啶緩沖液(pH7.4):稱2,4,6-三甲基吡啶1.21g或吸取1.32ml,溶于蒸餾水50ml中,用1mol/L HCl調pH至7.4(約3~4ml),并稀釋至100ml。因三甲基吡啶易揮發,應經常校pH。

      ②0.56mol/L硫酸肼溶液(pH7.4):稱硫酸肼(NH2-NH2·H2SO4)7.29g,溶于60ml 1mol/L NaOH中,調pH至7.4,用水稀釋至100ml。

      ③2mmol/L碘醋酸溶液(pH7.4):稱碘醋酸37mg,溶于0.1mol/L NaOH 2ml中,用水稀釋至100ml。

      ④50mmol/L 1,6-二磷酸果糖底物液(pH7.4):稱取1,6-二磷酸果糖二鈉鹽384mg,溶于10ml蒸餾水中,用1mol/L NaOH調pH至7.4,以蒸餾水稀釋至20ml。冰箱保存可用2周。

      ⑤100g/L三氯乙酸。

      ⑥0.75mol/L NaOH溶液。

      ⑦1g/L DNPH溶液:稱取DNPH 100mg,用2mol/L HCl溶解并稀釋至100mL。

      ⑧2g/L二羥丙酮貯存標準液:準確稱取二羥丙酮200mg,用蒸餾水溶解并稀釋至100ml,置冰箱中48~72h充分解聚后使用。

      ⑨0.2g/L二羥丙酮應用標準液:將貯存標準液用蒸餾水做10倍稀釋。

      2、酶偶聯法:

      ①底物緩沖液:稱220mg Na2FDP·8H2O(或370mg三環已氨FDP·H2O),6.2mg碘醋酸,溶于90ml蒸餾水中,加入0.75ml 2,3,6-三甲基吡啶,混合,用5mol/L HCl調pH至7.4(約0.6ml),用蒸餾水稀釋至100ml。2~8℃可穩定4周。此液含三甲基吡啶55mmol/L,碘醋酸0.3mmol/L,FDP 4mmol/L。

      ②15mmol/L NADH溶液:稱25mg Na2NADH及20mg NaHCO3,溶于2ml蒸餾水中,2~8℃穩定4周。

      ③GDH/TPI/LDH懸液(Boehfinger Mannheim公司產品):用3.2mol/L硫酸銨溶液稀釋成混合酶溶液,使各酶濃度為甘油-1-磷酸脫氫酶(GDH)>75KU/L、磷酸丙糖異構酶(TPI)>500KU/L,乳酸脫氫酶(LDH)>233 KU/L(25℃),2~8℃均可穩定1年,用前充分混勻。

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