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  • 發布時間:2022-05-12 15:52 原文鏈接: 血管緊張素轉化酶的注意事項

      1、三硝基苯磺酸鈉(INBS)顯色法:

      (1)標本在室溫或冰箱存放1周,酶活力無明顯變化,-15℃保存3周酶活性穩定。

      (2)膽紅素對ACE有明顯抑制作用,故重度黃疸可使測定結果偏低。EDTA是ACE的強抑制劑,NaCl和Na2SO4對ACE有明顯的活化作用,溶血、脂血對結果無影響。

      (3)本法與紫外分光光度法酶活力單位一致,但其測得值為紫外法的9倍。

      2、酶偶聯法:

      (1)當底物pH 8.0,GGCN 1.0mmol/L,GGT6.7ku/L時,ACE活性與吸光度值有良好線性。線性范圍大,即使ACE在1500U/L,不用稀釋也可獲得理想結果。

      (2)GGCN濃度選擇:本反應體系中GGCN既是測定酶ACE的受體,又是指示酶GGT的供體。以1.0mmol/L的GGCN最理想,在此濃度下GGCN與吸光度保持良好的線性。

      (3)GGT對測定的影響:本反應利用GGT將雙甘肽與GGCN偶聯,生成黃色的3-羧基-4-硝基苯胺,其加入量可直接影響測定結果。GGT高濃度可使底物過度消耗,使吸光度偏離曲線;低濃度GGT又使吸光度偏低,靈敏度不高。每次加入0.335 U GGT,可獲得理想吸光度與線性。在此濃度下,酶基質液的空白管吸光度<0.1A。

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