血細胞計數器計數法

血細胞計數器含有 2 個室，每個室充滿并蓋上蓋玻片后總體積為 9x10-3 ml, 每室有 9 個大方格，因此蓋上蓋玻片后每個大方格的容積為 0.1 mm3 或 1.0x10-4 ml，對計數來講，9 個大方格再進行分隔沒有必要，可以忽略不計。

細胞樣本

胰蛋白酶細胞培養液

毛細吸管載玻片蓋玻片

1、按前述方案（見「胰蛋白酶處理分離細胞」）用胰蛋白酶處理細胞，細胞重懸于細胞培養液中。

2、用毛細吸管吸出欲計數的兩份細胞標本。依靠毛吸管作用細胞懸液進人覆蓋蓋玻片的計數器。

3、對細胞計數器兩邊的 9 個大方格中各 5 個格即共 10 個格進行計數。

4、合汁 10 個大方格的細胞數（每室 5 個，共 2 室），算出 1x10^-3 ml 中的細胞數（每個大方格 1x10^-4 mlx10 個大方格=10^-3 ml 容積)。細胞總數乘以 1000 即得每毫升計數細胞懸液的細胞數。

5、計數完畢后立即用雙蒸水清洗計數器和蓋玻片，然后用 70% 乙醇清洗，用擦鏡紙擦干。

應用計數器計數出現的某些錯誤的原因：

• 取自原始細胞懸液的不均勻取樣。原始細胞懸液應攪動混勻，在細胞計數過程中細胞不應沉淀至容器的底部。

• 計數器室內充填不夠或過度填充。計數室的容積是基于蓋玻片平穩地置于計數器邊緣上，過度充填增加被計數的體積。

• 細胞團、細胞團不易通過毛吸作用進人計數室，故被排斥在計數之外進人計數室的小細胞團較難精確計數，甲個分散狀細胞懸液對精確計數來講是至關重要的，細胞應徹底混合達到均勻化。

來源于細胞實驗指南（上冊)，作者：黃培堂。