補體結合反應實驗

實驗材料 傷寒的抽出液

試劑、試劑盒 豚鼠血清兔血清綿羊紅血球

儀器、耗材 小試管試管架水浴鍋

實驗步驟

一、預備試驗

預備試驗包括溶血素效價的滴定，補體效價的滴定，抗原效價的滴定及被檢血清的處理。

1.  溶血素效價的滴定：按照下表加入各物

凡最高稀釋度的溶血素可呈現完全溶血者為一個單位。依上表結果第10管（即1：4000倍稀釋）0.5毫升溶血素為一個單位，在溶血反應中常用0.5毫升中含有2個溶血素單位的溶液，所以試驗時應取1：2000倍稀釋的溶液。

2.  補體單位滴定：依下表加入各試劑

能引起完全溶血的最小補體量稱為準確單位，上表中第3管（即0.3毫升），但因補體的效價可能有部分損失，故普通稍高的一管為實用單位，實際試驗時須用兩個實用單位。

上表的結果為：

補體標準單位：0.3毫升

補體實用單位：0.35毫升

補體兩個實用單位：0.70毫升

因試驗時是兩個實用單位的補體0.5毫升，可依下列比例關系換算：

20：0.7=ⅹ：0.5

ⅹ= 14.3

即須將補體稀釋14.3倍，用0.5毫升則含有兩個實用單位。

3.  抗原的滴定

在用已知抗原測定未知抗體時，必須先滴定抗原效價以決定本試驗時所需抗原的最適濃度（反之用已知抗體測定未知抗原時，則需滴定抗體效價） 

如血清對照管呈完全或部分不溶血是為抗補體現象。血清嚴重污染細菌，混有淋巴液或顯著溶血時，常產生很強抗外體作用。又如試管、吸管不清潔，也可出現抗補體。若有抗補體發生，應抽血重試驗。