將免疫溶血作為指示系統，用以檢測另一反應系統中抗原或抗體。該方法并非用于補體的檢測，而是利用補體的溶細胞作用進行各種物理狀態的抗原抗體測定。
一、試驗原理
包括：
①反應系統：已知抗原(或抗體)與待測抗體(或抗原);
②補體系統;
③指示系統：SRBC與相應溶血素預先結合，成為致敏綿羊紅細胞。
反應分兩步進行。首先反應系統與補體作用；第二步：指示系統利用剩余補體反應。如反應系統中有抗體或抗原，則形成免疫復合物而固定和消耗補體，使后加入的SRBC-抗SRBS指示系統無多余補體可利用，則無溶血反應發生，反之亦然。不溶血為補體結合試驗陽性。
二、試驗方法
(一)試劑的準備
1.抗原或抗體
2.補體：
采用豚鼠血清為補體。
3.待測標本：
及時分離血清用于檢測或-20℃保存備用。試驗前，應先將血清56℃加熱30分鐘(或60℃3分鐘)以滅活補體。
血清標本遇有抗補體現象時，可作下列處理：
①加熱滅活時提高12℃;
②-20℃凍融后離心去沉淀;
③以3mmol/L鹽酸處理;
④加入少量補體后再行滅活;
⑤以白陶土處理;
⑥通入CO2;
⑦以小白鼠肝粉處理;
⑧用含10%新鮮雞蛋清的生理鹽水稀釋血清。
(二)正式試驗：小量法較為常用。
三、方法評價
補體結合試驗是一經典的免疫技術，具有靈敏度高、可檢測的抗原或抗體范圍廣泛等優點。該方法無需特殊設備，結果容易觀察，試驗條件要求不高，一般醫院均具備開展的條件。