解析多肽分離實驗

多肽混合物

0.05 mol／L 和 0.25 mol／L 磷酸鈉緩沖液(pH 2.30 存儲于 4℃) 0.1 mol／L 氫氧化鈉

75 μm 內徑的融合硅毛細管柱 CE 儀器

1. 用以下溶液沖洗進行預處理毛細管：

10 倍柱體積的 0.1 mol/L NaOH，在低壓（0.5 lb/in²）下

10 倍柱體積的水

4 倍柱體積的 0.25 mol/L 磷酸鈉緩沖液，pH 2.30。

存儲柱于 0.25 mol/L 磷酸鈉緩沖液，pH 2.30，25℃。

2. 將 10 nmol （約 300 g） 溶于 10 ml 的 0.05 mol/L 磷酸鈉緩沖液，pH 2.30，制備多肽混合物。以每管 100 μl 凍存未用的混合物。

3. 在 0.5 lb/in²，10 s 內用低壓注射上樣 10～20 nl 樣品。

4. 使用以下條件分離多肽混合物：

電解質：0.05 mol/L 磷酸鈉緩沖液，pH 2.3

探測波長：200 nm

溫度：25℃

電壓：25 kV

5. 用以下溶液清洗柱子：

0.5 min，水

1.0 min，0.1 mol/L NaOH

1.5 min，水

1.0 min，0.25 mol/L 磷酸鈉緩沖液，pH 2.30

室溫存儲柱子于運行緩沖液或水中。