解脈支原體的分離培養解脈支原體可以在含有尿素的人工培養基中生長，分解尿素產生氨，使培養基變為堿性，培養基中的指示劑由黃變紅。因此，如將標本接種于液體培養基中，液體培養基由黃變紅，液體仍澄清時，則可能有支原體生長。此時吸出培養物少許，經稀釋后接種于固體或半固體培養基中，經3-5天培養。檢查時，先用Di-errs染液染色，再用低倍鏡觀察，如見到呈“油煎蛋”樣集落，則標本為陽性。
