根據病史、癥狀和體征可作出初步診斷。此外，還需作必要的化驗，如血常規、尿常規、宮頸管分泌物及后穹隆穿刺物檢查。
急性盆腔炎的臨床診斷標準，需同時具備下列3項：
1.下腹壓痛伴或不伴反跳痛；
2.宮頸或宮體舉痛或搖擺痛；
3.附件區壓痛。下列標準可增加診斷的特異性：宮頸分泌物培養或革蘭染色涂片淋病奈氏菌陽性或沙眼衣原體陽性；體溫超過38℃；血WBC總數>10×109/L；后穹隆穿刺抽出膿性液體；雙合診或B型超聲檢查發現盆腔膿腫或炎性包塊。由于臨床診斷急性輸卵管炎有一定的誤診率，腹腔鏡檢查能提高確診率。腹腔鏡的肉眼診斷標準有：①輸卵管表面明顯充血；②輸卵管壁水腫；③輸卵管傘端或漿膜面有膿性滲出物。在作出急性盆腔炎的診斷后，要明確感染的病原體，通過剖腹探查或腹腔鏡直接采取感染部位的分泌物做細菌培養及藥敏結果最準確，但臨床應用有一定的局限性。宮頸管分泌物及后穹隆穿刺液的涂片、培養及免疫熒光檢測雖不如直接采取感染部位的分泌物做培養及藥敏準確，但對明確病原體有幫助，涂片可作革蘭染色，若找到淋病奈氏菌可確診，除查找淋病奈氏菌外，可以根據細菌形態及革蘭染色，為選用抗生素及時提供線索；培養陽性率高，可明確病原體；免疫熒光主要用于衣原體檢查。除病原體的檢查外，還可根據病史、臨床癥狀及體征特點做出病原體的初步判斷。