實驗概要
抗補體試驗是根據血清中存在的免疫復合物能結合C1的特性，將已知量的豚鼠補體先與經56℃滅活補體的被檢血清一起溫育，然后加入致敏紅細胞，觀察其溶血程度，如果被檢血清中含有免疫復合物就能消耗補體，致使致敏紅細胞的溶血程度明顯減弱。抗補體試驗很敏感，可測得0.1～0.5ng/ml的免疫復合物。
主要試劑
pH值74巴比妥緩沖液(有鈣、鎂和無鈣、鎂兩種)。
主要設備
72型分光光度計、電熱恒溫水浴箱(37～65℃)、離心機等。
實驗材料
1. 綿羊紅細胞新鮮羊血液脫纖，與抗凝保存液混勻后，分裝于10ml玻璃試管，置4℃冰箱內保存，可達3周左右。
2. 溶血素以綿羊紅細胞免疫家兔后，所獲得的兔抗羊紅細胞免疫血清。
3. 豚鼠補體取4～5只豚鼠，心臟采血，每只4～5ml，分離血清，混合后分裝安瓿瓶，冷凍干燥保存。
實驗步驟
1. 2%致敏綿羊紅細胞的制備
4%綿羊紅細胞：將抗凝保存的綿羊紅細胞以10倍于壓積綿羊紅細胞容積的生理鹽水洗滌2次，每次2500 r/min離心5min，第3次以pH值7.4巴比妥緩沖液應用液(不含鈣、鎂)洗滌，以后盡可能的吸去上清液，以壓積紅細胞制備4%綿羊紅細胞懸液。為了使紅細胞懸液標準化，取0.1ml 4%綿羊紅細胞懸液加入5ml、pH值7.4巴比妥緩沖液應用液(不含鈣、鎂)，以72型分光光度計讀數(波長542nm，1cm比色杯)，透光率應為40%，否則應予以調節。也可采用半溶管光密度數作調節，即將0.5ml 4%綿羊紅細胞懸液加入95ml蒸餾水，于72型分光光度計讀數(波長542nm，05cm比杯色)，光密度數應為0.20左右。
2. 單位溶血素
1) 將已知效價的溶血素用pH值7.4巴比妥緩沖液(不含鈣、鎂)稀釋為2單位。將4%綿羊紅細胞懸液與2單位溶血素等量混合，即為2%致敏綿羊紅細胞。
2) 2單位豚鼠補體的配制
將低溫保存已知效價的豚鼠血清用pH值7.4巴比妥緩沖液(不含鈣、鎂)稀釋為2單位，及與其相鄰近值的2管，共3管。如豚鼠補體效價為100單位/ml，可分別作1∶50(2單位)、1∶40及1∶60稀釋，分別取0.3ml，然后依次操作：
a. 加入0.3ml pH值7.4巴比妥緩沖液(不含鈣、鎂)，4℃ 60min；
b. 加入0.3ml 2%致敏綿羊紅細胞懸液，37℃作用15min；
c. 再加入3ml同樣緩沖液，混勻后，2500 r/min離心5min，取上清液以72型分光光度計讀數(波長542nm，比色杯05cm)，選擇光密度在0.1～0.13管為最適宜豚鼠補體稀釋倍數。
3) 測定：
a. 取0.15ml待檢血清，56℃滅活60min；
b. 加入0.15ml pH值7.4巴比妥緩沖液(不含鈣、鎂)及0.3ml豚鼠血清(2單位左右)，4℃ 60min，使之充分作用；
c. 加入0.3ml 2%致敏綿羊紅細胞，37℃ 15min；
d. 加入3ml同樣緩沖液，混勻后，2 500 r/min離心15min，取上清液以72型分光光度計讀數。每次測定須設有陽性、陰性血清對照及空白對照(以0.15ml緩沖液替代血清)。測定管光密度數低于空白管對照50%以下者判為陽性。