貝類毒素的LCMS／MS檢測

貝類毒素經常能導致中毒事件，因此建立一種高靈敏度、高特異性的檢測方法非常重要。本文開發了串聯四級桿質譜MRM掃描方式測定生物毒素AZA1的方法，選擇性好，靈敏度高，檢測結果可達0.001 pg/μl，在復雜基質低濃度時表現出了很好的重現性，克服了傳統方法檢測靈敏度低、結果假陽性等缺點。

生物毒素是一類生物源小分子化合物，近年來，沿海地區頻繁出現Azaspiracid（AZA）導致的中毒事件，可引起惡心、嘔吐、腹瀉、胃痙攣等中毒癥狀，給水產品質量安全工作帶來了挑戰。本文以原甲多藻酸類貝毒素AZA1為例，開發了一種高靈敏度、高特異性的生物毒素液質檢測方法。

實驗部分

儀器與試劑

美國AB SCIEX API4000 液相色譜-串聯四極桿質譜聯用儀，配有電噴霧（ESI）離子源；試劑為Merk公司的色譜純級甲醇、乙腈、水，以及Fluka公司的色譜純級甲酸、甲酸銨。

色譜條件

液相色譜：Shimadzu UFLC 系統；色譜柱：Symetry 2.1mm×100mm，3.5μm；流動相A：含1mM甲酸銨和0.1%甲酸的水溶液；流動相B：含1mM甲酸銨和0.1%甲酸的乙腈/水（90%，V/V）溶液流速：0.3ml/min。

質譜條件

API4000系統；離子源：Turbo VTM；

離子化模式：TurboIonSpray（+ESI）

結果與討論

方法靈敏度

通過MRM定量方式，選擇性強，能消除干擾，定量下限0.001pg/μl的AZA1標準溶液（MRM842.6/824.6）的色譜圖的響應為3347psi, 信噪比為39.3，圖譜如圖1所示。

工作曲線和重現性

AZA1在0.01pg/μl到20pg/μl之間顯示了良好的線性關系，r為0.9992。重復進樣6次，LOQ為0.001pg的重現性為 2.14%，0.005 pg的重現性為0.58%，0.01pg的重現性為3.38%，0.1pg的重現性為1.28%，1pg的重現性為21.28%，20pg的重現性為0.48%。圖2為AZA1的工作曲線。

小結

API4000系列串聯四級桿通過MRM掃描方式建立測定生物毒素AZA1的方法，選擇性好，靈敏度高，檢測結果可達0.001pg/μl；在復雜基質低濃度時表現出了很好的重現性，克服了傳統方法檢測靈敏度低、結果假陽性等缺點。