1. 4 真菌小培養 將馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基切割 成小塊置于載玻片上,用接種環挑取純培養的絲狀真 菌接種于培養基的四角,蓋上蓋玻片, 28 ℃培養2~ 3 d后用乳酸棉蘭酚染色,于高倍鏡下觀察真菌形態。
注: A表示血培養直接涂片革蘭染色鏡檢結果( 10×100); B表示 35 ℃孵育48 h菌落形態; C表示28 ℃孵育48 h菌落形態; D表示真菌 小培養乳酸棉蘭酚染色鏡檢結果( 10×40)。 圖3 病例2血培養陽性涂片結果及純培養菌落 特點與鏡下結果
2 結 果
2. 1 質譜鑒定結果 2例患者均在入院后送檢血培 養,在血培養報陽后直接用質譜儀進行檢測。病例1 鑒定結果為新型隱球菌,質譜評分為2. 142。病例2 鑒定結果為青霉菌屬某些種,質譜評分為1. 474。見 圖1。
2. 2 傳統鑒定結果 病例1:患者血培養雙側需氧瓶 分別于67、 70 h報警陽性,涂片革蘭染色鏡檢找到正 圓形的芽生孢子。將標本接種在血瓊脂平板、巧克力 瓊脂平板及沙保弱培養基上, 35 ℃ 48 h培養均長出 白色光滑酵母樣菌落。經API 20 C板條鑒定為新型 隱球菌。見圖2。病例2:患者血培養雙側需氧瓶分別于77、 89 h 報警陽性,涂片革蘭染色找到豐富的菌 絲及少量真菌孢子,孢子兩頭鈍圓、中間有隔的臘腸 形。將標本接種在血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板及沙 保弱培養基上,分別于28 ℃和35 ℃孵育48 h,血平 板上可見灰白色臘樣、膜狀平坦菌落,菌落中央可見 臍狀凹陷; 35 ℃培養的沙保弱斜面上可見白色酵母 樣菌落,不產生紅色色素。28 ℃培養的沙保弱斜面上 可見淡紅色絨毛狀菌落,整個培養基被染成玫瑰紅 色。真菌小培養后可見分枝分隔菌絲,分生孢子梗光 滑,呈帚狀枝分散,多為對稱雙輪生;梗基上有3~6 個瓶梗,頂端變窄。通過培養的雙相性以及帚狀枝形 態可鑒定為馬爾尼菲藍狀菌。見圖2、 3。
2. 3 最終診斷結果 病例1患者經神經內科會診后 考慮腦血管意外及 HIV腦病,經市傳染病醫院會診 后考慮AIDS,中樞神經系統感染,隱球菌腦炎。予甘 露醇脫水,伏立康唑靜滴抗真菌及糾正電解質紊亂等 治療,并轉至市傳染病醫院進行進一步治療,目前患 者情況穩定,恢復良好。病例2患者淋巴結活檢示鎖 骨上淋巴組織增生,中性粒細胞灶性浸潤,小膿腫形 成伴多量組織細胞反應,傾向感染性變化。請市傳染 病醫院會診考慮AIDS,并轉至市傳染病醫院進行進 一步治療。
注: A表示血培養直接涂片革蘭染色鏡檢結果( 10×100); B表示 35 ℃孵育48 h菌落形態; C表示28 ℃孵育48 h菌落形態; D表示真菌 小培養乳酸棉蘭酚染色鏡檢結果( 10×40)。 圖3 病例2血培養陽性涂片結果及純培養菌落 特點與鏡下結果