起始tRNA initiation tRNA是指能特異性地認別mRNA上的起始密碼子，是使蛋白質合成開始的tRNA。在細胞中有兩種甲硫氨酸tRNA分子，其中的一種就起這種作用。
在大腸桿菌中，已接受甲硫氨酸的tRNAfMet在被甲酰化之后，以其30S核糖體亞基與mRNA共同結合，使蛋白質合成開始。即使在以哺乳類為首的真核細胞中，而這種起始機理也沒有本質的差別，但是，在真核細胞中，由于缺乏甲酰化酶，所以，未甲酰化的甲硫氨酸tRNA成為起始tRNA。
