1、活力測定：測定k4值的方法操作如下：
取2個比色池（帶蓋，光程1厘米），按下表加入反應物
*酶液：將1毫克蛋白/毫升的酶液用磷酸鹽緩沖液稀釋10倍后應用。
加好反應物，搖勻，在470nm 讀出OD值，為t=0 的讀數。立即加0.01毫升40mM過氧化氫溶液于2個比色池中，即刻搖勻并記時，每隔30秒鐘讀數一次，約5分鐘。并記下實驗時的室溫。
將所測樣品的OD值減去相應時間對照的OD值，然后以OD值為縱坐標，時間為橫坐標作圖。得一直線，計算出平均每分鐘光密度的增加值，即求出△x/△t，按公式⑻求出k4值。實際的實驗值k4 = 2.2×10，k4 = 3.1×10，而k4 應當為3.3×10。該方法用于測定粗的無細胞提取液誤差較大。
因為某些物質可干擾四鄰甲氧基連酚的形成。
或不求k4值，而把在上述條件下，每分鐘OD470增加0.001所需酶量定為1個HRP活力單位。
2、蛋白質含量的測定：
將酶液適當稀釋后，用 Folin一酚試劑法比色測定蛋白質含量。