l過硫酸銅和鐠銣濾光片的吸收曲線的測繪，了解分光光度計波長度盤上標度的正確性．
2、掌握721分光光度計波長校正方法（鐠銣濾光片法）及重復性檢查．
| 實驗方法原理 | 鐠銣濾光片在可見光區域最大吸收峰為529nm，利用這個特性校正721分光光度計 |
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| 試劑、試劑盒 | 硫酸銅標準儲存液血清總蛋白測定液 |
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| 儀器、耗材 | 721分光光度計鐠銣濾光片坐標紙燒瓶吸管 |
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| 實驗步驟 | 一、 校正
1. 預熱儀器
2. 置波長580nm處，T ％調至最大，用一白紙條觀察是否有光強均勻的光斑在吸收池處出現，調節光源燈泡使用其符合要求．
3. 把靈敏度鈕置于最低端，波長度盤置529nm處，反復調節透光度和100％直至穩定，將鐠銣濾光片插入光路，仔細旋轉波長度盤，找到T值最低點，此時波長應為529nm（λm）
4. 計算波長誤差：Δλ＝λ－λm
5. 校正：調波長于529nm處，取出鐠銣濾光片，調節T值至于100％處，再插入鐠銣濾光片，打開蓋板，調節波長校正螺絲，使值最低．波長校正步驟反復檢查波長誤差，直至符合要求。
二、重復性檢查
1. 用蒸餾水作空白將波長度盤固定在先690nm，調節透光度為100％．
2. 連續測量五次硫酸銅標準液（31.35mol／L即 2000ug／ml），分別記錄
透光度值。
3. 計算：Δl=lmax－lmin。
Lmax. lmin分別為透光度最大值和最小值，一般要求Δl小于0.5％
三、 吸收曲線制作
1. 連續測定五個不同濃度的蛋白標準液，記錄其吸光度值．
2. 分別以濃度為橫坐標. 吸光度為縱坐標繪制吸收曲線． 展開 |
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