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  • 發布時間:2019-03-30 15:29 原文鏈接: 鄰氨基苯甲酸合成酶的測定實驗

    實驗方法原理

    分支酸+L-谷氨酰胺 → 鄰氨基苯甲酸+丙酮酸+L-谷氨酸。


    分支酸丙酮酸-裂解酶(氨基-受體)是含苯環氨基酸生物合成中的一個重要酶,起始苯丙氨酸生物合成分支。分支酸非常不穩定需要保存在 -70℃。Gibscm(1964)已經描述了分支酸的分離方法。

    實驗材料

    分支酸丙酮酸-裂解酶

    試劑、試劑盒

    分支酸谷氨酰胺MgCl2二硫赤蘚糖醇

    儀器、耗材

    熒光光度計

    實驗步驟

    實驗所需「試劑」具體見「其他」



    37℃,激發 325 nm、發射 400 nm 處測定熒光。

    展開 
    注意事項
    其他

    試劑:



    10 mmol/L 分支酸(Mr=361.5,鋇鹽,18. 1 mg 溶于 5 ml H2O 中)


    0.2 mmol/L 谷氨酰胺(Mr=146.2;292 mg 溶于 10 ml H2O 中)


    0.1 mol/L MgCl2(Mr=203.3;2MgCl2·6H2O,03 mg 溶于 10 ml H2O)


    0.1 mol/L 二硫赤蘚糖醇(DTE,Mr=154.2;154 mg 溶于 10 ml H2O 中)

    展開


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