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  • 發布時間:2019-09-10 10:54 原文鏈接: 配制電解質梯度膠實驗

               

    試劑、試劑盒

    本方法包括方案 8 中所有物品 加上: 甲酰胺(100%) 離子梯度膠 醋酸鈉

    實驗步驟

    材料

    本方法包括方案 8 中所有物品,加上:
    甲酰胺(100%)

    離子梯度膠用 1XTBE 配制,有無甲酰胺均可。關于含甲酰胺的聚丙烯酰胺凝膠,請見方案 9。

    醋酸鈉(3mol/L,PH7.0)

    方法

    1. 依方案 8 步驟 1~8。

    2. 在實驗桌的工作區上鋪上襯塑料的保護紙。

    3. 參照方案 8 或 9 配制變性聚丙烯酰胺凝膠。

    4. 將膠放在電泳裝置中。在上槽中加入 0.5XTBE 緩沖液,在下槽中加入 1 份 3mol/L 醋酸鈉和 2 份 1XTBE。按照方案 11 操作。
    電泳時,指示染料的移動逐漸變慢,當溴酚藍到達底部時,移動幾乎停止。一般,繼續電泳直到二甲苯藍離底部只有 5~10 cm 而溴酚藍到了底部。
    推遲加入 3mol/L 醋酸鈉可以調整壓縮 DNA 條帶的時間。電泳開始時,上下槽都用 1XTBE; 在適當時候,在下槽加入一半體積的 3 醋酸鈉。根據經驗,這樣可以壓縮條帶的不同區域,讀出最多的條帶。

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