醬油中3氯1,2丙二醇的分析方法

前言

氯丙醇是丙三醇上的羥基被氯取代所產生的一類化合物，包括單氯丙二醇：3-氯-1,2-丙二醇(簡稱3-氯丙醇，3-MCPD)，2-氯-1,3-丙二醇(2-MCPD)和雙氯丙醇：1,3-二氯-2-丙醇(1,3-DCP)，2,3-二氯-1-丙醇（2,3-DCP）。在氯丙醇系列化合物中，污染食品的主要成分是3-MCPD。如果在生產醬油中用了添加鹽酸的方法來加速生產，這會導致產品中氯丙醇含量偏高，對人體有害，會影響人的健康。

本文通過重現國標，建立了醬油中3-MCPD的前處理方法，該方法簡便且穩定性較好。

實驗部分

儀器、試劑與材料

主要儀器設備

氣相色譜串聯質譜儀

試劑材料

正己烷、乙酸乙酯為色譜純；氯化鈉、無水硫酸鈉均為分析純；

七氟丁酰基咪唑衍生劑；

3-MCPD標準品（純度99%）：乙酸乙酯溶解；

D5-3-MCPD內標溶液：乙酸乙酯溶解；

Cleanert MCPD：最大上樣量5 mL。

樣品制備

樣品提取

稱取醬油樣品4 g于50 mL離心管中，加入0.8 μg/mL的D5-3-MCPD內標40 μL，超聲5 min混勻，待凈化。

樣品凈化

將上述待凈化液上樣于Cleanert MCPD氯丙醇專用柱上，平衡10 min。用10 mL正己烷淋洗，棄去流出液，抽干小柱。再用15 mL乙酸乙酯洗脫，收集洗脫液于30℃氮吹至約0.5 mL，用正己烷定容至2 mL，待衍生化。

衍生化

向上述的待衍生化溶液中加入0.04 mL的七氟丁酰基咪唑，立即密塞，渦旋混合30 s，于70℃保溫20 min。取出冷卻至室溫，加入2 mL 20%氯化鈉溶液，渦旋混合1 min，靜置分層，且水相澄清。轉移上層正己烷層，加入約0.3 g的無水硫酸鈉進行除水，轉移上清液至樣品瓶中，待檢測。

實驗條件

色譜柱：DA-5MS色譜柱，30 m × 0.25 mm × 0.25 μm；

進樣口溫度：250℃；柱溫：初始溫度50℃，保持1 min，以2℃/min 升至90℃，再以40℃/ min升至270℃ 保持5 min；

載氣：氦氣，純度≥99.999％；

流速：1 mL/min；

電離方式：EI源；

離子源溫度：250℃；

溶劑延遲：5 min；

進樣方式：不分流進樣；

樣量：1 μL；

監測方式：選擇離子掃描（SIM）。

表1. 16種鄰苯二甲酸酯監測離子參數

結果與討論

實驗結果

由表2可知，采用固相萃取結合GC-MS的方法檢測醬油中的3-MCPD，加標回收率在90%以上，能夠滿足標準要求。由圖1、圖2、圖3可知，用DA-5MS色譜柱檢測3-MCPD，峰型和保留時間與國標差距不大。

表2. 醬油中3-MCPD加標回收實驗結果(添加水平0.02 mg/kg，n=3)

圖1. 0.04 μg/mL 3-MCPD衍生物與內標衍生物標準溶液色譜圖

圖2. 醬油基質空白色譜圖

圖3. 醬油基質0.02 mg/kg加標色譜圖

結論

本實驗重現GB5009.191-2016食品中氯丙醇測定的國家標準，用Cleanert MCPD小柱結合氣相色譜串聯質譜的方法對醬油中的3-MCPD進行了測定。對于加標量為0.02 mg/kg的樣品，加標回收率在91.0%，符合檢測要求，且變異系數小于10%，穩定性良好。說明Cleanert MCPD小柱能夠用于醬油中3-MCPD的檢測。

附：相關產品

應用編號：AF10158